大黄颗粒对大鼠的长期毒性试验研究.docVIP

大黄颗粒对大鼠的长期毒性试验研究 　　[摘要] 目的 观察连续灌胃给予大黄颗粒对大鼠产生的毒性反应，为临床合理应用提供依据。 方法 将120只大鼠按体重随机分为对照组和大黄颗粒高、中、低剂量组，每组30只，雌雄各半。各剂量组分别灌胃给予大黄颗粒10、5、2.5 g/kg（生药），对照组给予等体积纯化水，1次/d，连续给药26周，大鼠每周称重，给药结束时测试大鼠尿常规、血常规、血生化、脏器系数及病理组织学变化。 结果 高剂量组大鼠排稀便，体重增长缓慢，精神萎靡，尿蛋白阳性，血糖、氯离子轻度升高，肾小管上皮细胞轻度肿胀。中、低剂量组大鼠各项检测结果未见与用药相关的毒性变化。 结论 大黄颗粒长期连续灌胃安全剂量为≤5 g/kg。 　　[关键词] 大黄颗粒；长期毒性；大鼠 　　[中图分类号] R282.71 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（a）-0004-03 　　大黄药理作用广泛，《神农本草经》载：“大黄，荡涤肠胃，推陈致新，通利水谷，调中化食，安和五脏[1-5]。”现代药理研究表明其具有抗感染、抗病毒、抗肿瘤、治疗糖尿病等作用，既可内服，亦可外用，在临床上可大量使用[6-12]。据统计，全国8000多种中药制剂中有800多种含有大黄，大多数降脂减肥、排毒养颜类中成药均含有大黄[13]。目前对大黄长期服用的有关毒理学方面报道较少，为探讨其安全性，本项目进行了大黄颗粒长期毒性试验研究。 　　1 材料与方法 　　1.1 受试药物 　　大黄颗粒，由天津现代医药开发研究所提供。 　　1.2 试验动物 　　Wistar种大鼠（SPF级），雌雄各半，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。 　　1.3 试验试剂 　　1.3.1 生化试剂 尿素氮（BUN）试剂盒、血糖（PG）、丙氨酸肌酐（CREA）等，上海丰汇医学科技有限公司生产。 　　1.3.2 目测八联试纸带（OCTO TEST PAPER） 广州花都高尔宝生物技术有限公司生产。 　　1.4 试验仪器 　　F-820血细胞计数仪、BECKMAN CX4 COULTERTM PRO全自动生化分析仪。 　　1.5 试验方法 　　Wistar大鼠，体重85～105 g，按体重随机分为高、中、低3个剂量组及对照组，3个剂量组的给药剂量分别为10、5、2.5 g/kg（生药），分别相当于人用临床剂量（0.1 g/kg）的100、50、25倍。每组30只动物，雌雄各半。每日定时灌胃给药1次，每周给药6 d，连续给药26周，给药体积为10 ml/kg；对照组给予等体积纯化水，给药时观察动物的一般状态，每周测体重1次。26周末给药后（每组雌雄各10只）及停药4周后（每组雌雄各5只）动物禁食24 h，用目测八联试纸法测定尿液。股动脉取血进行血常规、血生化及电解质检查。各组动物分别剖取脑、心、肝、肾、脾等脏器称重并计算脏器系数，制成HE染色切片，进行组织学检查。 　　1.6 统计学方法 　　应用SPSS 13.0软件处理数据，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 一般状况 　　给药期间，供试品高剂量组大鼠精神萎靡，排稀便，被毛晦暗，中、低剂量组动物被毛光泽，眼、鼻、耳、口、生殖器无异常分泌物，大小便正常，未见有系统毒性症状出现。停药恢复期间，高剂量组大鼠状态逐步恢复。 　　2.2 各组体重及摄食量的比较 　　给药26周，与对照组比较，高剂量组雌、雄动物体重增长缓慢，摄食量减少（表1）。 　　2.3 各组尿常规的比较 　　给药26周，高剂量组雌、雄大鼠尿蛋白阳性动物例数增多，其余各指标与对照相比差异无统计学意义（表2）。 　　2.4 各组血常规、血生化及电解质检查的比较 　　各剂量组各项血液学指标与对照组比较差异均无统计学意义；高剂量组动物GLU、Cl-较对照升高，余指标差异无统计学意义，中、低剂量组与对照组相比差异无统计学意义（表3）。 　　2.5 各组脏器重量及脏器系数的比较 　　各剂量组脏器重量及脏器系数与对照组比较差异无统计学意义（表4、5）。 　　2.6 病理组织学观察 　　各剂量组动物解剖后见胸、腹腔未见出血点及积液，主要脏器大体观察未见明显病变。组织学检查除高剂量组雌、雄动物均可见肾小管上皮细胞肿胀外，其余脏器未见与药物相关的病理变化。 　　3 讨论 　　大黄，大苦大寒，有泻热通腑、荡涤肠胃之功，临床常用于大便不通、积滞泻痢、里急后重及溏而不爽等症[14-15]，是临床常用的传统中药。大黄颗粒是利用现代工艺技术开发的一种具有泻下攻积、凉血解毒、清热泻火、利湿退黄、逐瘀通经等功效的中药冲剂，使用广泛，对其长期服用的毒性反应、安全剂