人參皂甙Rb1对人表皮黑素细胞黑素生长的影响.docVIP

大连医科大学 硕士学位论文 人参皂甙Rb1对人表皮黑素细胞黑素生长的影响 姓名：卢珊珊 申请学位级别：硕士 专业：皮肤病与性病学 指导教师：涂彩霞 201106  硕士研究生： 声珊珊 目的：皮肤中黑素含量是决定皮肤颜色的主要因素之一。黑素细胞产生黑素， 并将其输送到周围的角质形成细胞，从而影响皮肤的颜色。黑素细胞生成黑素的 不足可以导致皮肤色素减退或脱失，促进黑素细胞的黑素生成是治疗色素脱失性 疾病的策略之一。酪氨酸酶是黑素细胞产生黑素的关键酶。近年研究发现，酪氨 酸酶主要受小眼畸形相关转录因子???的调控，而??的表达又受到上游 蛋白如?．?应答元件结合蛋????的影响。中药人参曾被用于白癜风等脱色 定黑素生成，免疫蛋白印记法测定酪氨酸酶和小眼畸形相关转录因子???的 后，酪氨酸酶、??蛋白表达明显增加，??明显激活。???牡鞍准っ窤  ??? ??? ??? ?????：??．? ??? ??? ? ??? ? ??? ? ?????????? ??? ?? ????? ??? ? ???????? ?? ?? ??? ?? ???????????? ????．????? ?? ??? ???琱????? ????? ???????????，?? ?????? ????? ????? ?????????? ?? ????篗????? ??????琣?????? ???? ? ??????瓻??? ???? ????? ???????????????? ?????  ????????? ?????甌???? ????? ????? ???琣 ?猧???????? ???? ? ????? ?? ?????? ??????篏????? ????? ??? ????? ????? ? ????? ?????  硕士研究生： ．争珊礅 指导教师：涂彩霞教授 指导小组： 通过与该核心结构相结合从而激活其相应的基因进行表达并且可以参与调控外界  黑素细胞中黑素的生成?．?。 在中医学中，人参具有大补元气、调和气血、固脱生津、安神等多种功效，近年 色素脱失性疾病【?以?。人参皂甙是中药人参中最具有活性调节作用的成分之一， 胞黑素生成的影响及其作用机制，以探讨其用于治疗色素脱失性皮肤病的前景。 一、实验试剂及器材 ??细胞来源 ??Ｋ垢吡??????現? ??叶?匪囊宜???，????拦? ?甅??嘌??安钩湮??????拦?  ?．左旋多巴?．??，????拦? ?．兔抗人???、???、?? ‘?．细胞全蛋白提取试剂盒????泄? ?瓹?孵箱 ?甐???超净工作台?罩菥换?璞赋? ??主要实验试剂配置 ??ヅＱG迮渲疲航ǘ炒嬗耄??嫣ヅＱG宸胖糜?℃冰箱中使其溶解，然后 中加入无菌双蒸水???疵顾???騯／支?屑尤胛蘧??羲??，无菌条件 ??黑素细胞培养基中加入??胎牛血清配置液，??? ?甈?溶液配制：分别准确称取??勰??????勰? 末??????粉末?．?  眼科剪将标本皮下组织及毛细血管去除干净后，将标本剪成约?? ? ??黑素细胞活力测定 个浓度均设立?龈纯祝?⑸枇⒁跣远哉兆???黑素细胞培养基?谒叵赴? ??，用酶标仪测定标本吸光度值???舛úǔの?? ??黑素细胞黑素含量测定  ??／?，将黑素细胞接种于 ??黑素细胞酪氨酸酶活性测定 ??／?，将黑素细胞 ???娜瞬卧磉癛?，每个浓度均 设立?龈纯祝?⑸枇⒁跣远哉兆???黑素细胞培养基?谒叵赴?和空白对照组 ?ゴ縈??谒叵赴?嘌??。不同浓度的人参皂甙????莸腇?作为阳性 ??黑素细胞酪氨酸酶、??、???及???蛋白表达测定 采用免疫蛋白印迹法【?拷?胁舛ǎ?肞?液清洗用黑素细胞原代培养法获取 ??．?的第??代黑素细胞??次，将细胞用细胞刮棒刮下 后转移至?管中，按细胞全蛋白提取试剂盒所述方法逐步提取黑素细胞的总蛋白， 替洗膜?危?糜谝〈采厦看?????，将硝酸纤维素膜置于玻璃平皿上，然后  样本?煅榻?型臣拼?怼Ｒ訮?．?为差异具有统计学意义。 ??瞬卧磉癛?对黑素细胞活力的影响 ?螅?捎盟募谆?嫉_蚶急壬ǚ??┓?进行测定， ? ? ? 图?瞬卧磉癛?对黑素细胞活力的影响与对照组相比，??獁? ??瞬卧磉癛?对黑素细胞黑素生成的影响 ? ?  莨 蛮 ?????，宰?????な翽?．?。 ??瞬卧磉癛?对黑素细胞酪氨酸酶活性的影响 ??曼畸形相关转录因子??????蛋白表达明显升高，??应答原件结 ? 酶氪鲢醢—·埔静??—?—一 ? 罱 图?瞬卧磉癛?对黑素细胞酪氨酸酶、??蛋白表达及??激活的影响与对照组相比， ??  ?甈?抑制剂??匀瞬卧磉癛?的促黑素生成