人參皂苷Rgl通过激活ER及IGF-IR信号通路对抗β-淀粉样蛋白的神经毒性.docVIP

青岛大学 硕士学位论文 人参皂苷Rgl通过激活ER及IGF--IR信号通路对抗β--淀粉样蛋 白的神经毒性 姓名：周丽苹 申请学位级别：硕士 专业：生理学 指导教师：陈文芳  ?．?，????毒性作用的分子机制，本研究应用??．?诱导??细胞损伤，采 ??及瞬时转染等多种实验方 ????????? 法，观察??訮??赴?谋；ぷ饔眉按萍に厥芴????? 以及???，??騄??的阻断效应。实验结果如下： ?瓵????擅飨越档虰?一?疊?的基因表达??．??，??け；た赡孀狝??? ?甀沁?擅飨陨?叽萍に胤从υ????? ?????????，??启动子的荧 因的表达??．??琑?可明显逆转上述改变??．??琍?．??籌????? 上述结果表明??擅飨远钥笰???对??细胞和小鼠海马神经元的损伤，  现的。本研究为临床防治阿尔茨海默病的新药研制提供了有力的理论和实验依据。 关键词：阿尔茨海默病，?坏矸垩?鞍?雌激素受体；胰岛素样生长因  ??Ⅱ之 ? ????? ? ???? ????，???????? ?? ????? ? ??? ???????? ?? ???? ? ????．???? ?? ????? ? ????? ? ???????????????????? ?? ????? ?? ??? ? ????? ? ?瓵??? ? ? ?????? ??????． ? ? ????? ? ? ??? ?????? ???????????． ??? ? ?????????瑆?? ? ? ????．??，??????．  ? ?瓵??? ??????? ??????? ? ????? ??? ????? ? ? ??? ? ??．?，?????甒?? ??????? ? ? ???甌?? ? ??? ? ???????? 硕士研究生周丽苹??硌? 指导教师 陈文芳教授 ??????：??????????? ???? ?? ? ????琾???? ???? ?? ???  引言 量的??矸垩?鞍??產??? ?】。但是?的病因及其发病机制，迄今尚不明确。目前临床上尚无有效的药物或方  青岛大学硕士学位论文 ??? 神经保护作用???。由于??与雌激素具有相同的作用靶器官，我们推测人参皂苷 子机制进行系统研究。 ?  第一章 ??实验试剂 ???????：购自???公司?⒐?，用??％生理盐水溶解，贮存浓度为?‘?。 ????：购自???公司，用??％生理盐水溶解，贮存浓度为???／?。 ??咛荄??汗喊譎???公司。 ??薹雍霥??汗鹤訥??公司。 ??ヅＱG澹汗鹤訦???公司。 ????? ??引物合成：上海生工生物工程技术有限公司。 ??磷酸盐缓冲液????．?? ??实验仪器 ?  青岛大学硕士学位论文 ??缛群阄滤?郏篋?瓸?型，上海一恒科学仪器有限公司。 ?? ?，??騃?．?拮抗剂??的作用下， 与?坏矸垩?鞍?????共同作用??琈?法测定检测细胞活力，???? ??? 检测???与???颍瑆??? ??饔??，测定荧光素酶活性。 ?? ?  值，可以反映活细胞的数目。 ???ヒ让赶??赴????????胄模???锨逡海?觢?培养液制备单 ??，??，???鹕讼赴??。每孔加入??的??芤???痬?， 选出最适的????的浓度。 ???法检测 ?? ??．?躌?提取 将??细胞接种于?装逯校?靠准酉赴??∫???? 善 ?  以促进裂解，室温下均值化样本??，以促使核蛋白的完全溶解。 ???蚈??值，以观察所提取样品的纯度，并计算其含量。???疧??值在 ???上游：??瓽? ???’；下游：??瓹? ???’；下游：??瓹? ? ????’： ??? ??’。 ??? ?  ????、上下游引 ???????．?? ??? ?℃????????，共?个循环。 表????、??虶??基因??从μ逑?总反应体积??? ??? ???? ??? ??薜っ??? ??／? 取???? ? ??蒸水内，???保存备用，用时取??苡趌? ?  青岛大学硕士学位论文 ??? 定容至?? 护???谟谢蛭轎??????．??或?一???痬?的情况下，与??????? ??．?骷譵的检测 ? ???条件设定： ?? ??? ??观察??粤姿峄疢?的影晌 ????簂? ?????????： ? 甲醇：?? ?  ??? ????????： ?? ? 将??细胞接种于?装逯校?靠准酉赴??∫簂???×??鱿赴???。 ??裂解液，用枪吹打数下，使裂解液与细胞充 ?  青岛大学硕士学位论文 表