人教版高中生物必修2实验九 DNA的粗提取与鉴定.docVIP

实验九 DNA的粗提取与鉴定 ●教材分析 本实验既是对组成细胞化合物的验证，也是加强学生对细胞中化合物的提取原理、方法、技巧的理解掌握，同时还是历年来各种考核的热点。因此，本实验的成功与否关系重大。 教材首先介绍了该实验的“实验原理”。（1）DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变的进行提取。（2）利用DNA不溶于酒精而细胞中的某些物质能溶于酒精进行提纯。（3）利用DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色进行鉴定。 教材接着说明了DNA的粗提取与鉴定的目的要求。要求学生初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。 教材第三部分清楚地列出了该实验的材料用具。特别是所列酒精、蒸馏水、柠檬酸钠溶液、氯化钠溶液、二苯胺试剂，在实验中一定要搞清楚它们的作用。 教材第四部分更为详细地介绍了该实验的方法和步骤。从取鸡血细胞、DNA的提取过程，一直到用二苯胺进行鉴定点滴不漏地作了说明。 为此，我们从如下几方面对该实验做了本质性的准备。 1.知识结构的联系：明确鸡血细胞的结构和物质组成，它是由细胞膜、细胞质、细胞核构成；细胞核又包括核膜、核液、核仁、染色质（染色体）；染色质主要是由DNA和蛋白质组成的，所以要想对DNA进行提取，必须把细胞弄破，然后采用相应的原理和方法才能提取出来。 2.相关知识的迁移：掌握该实验的知识点，对巩固《生命的物质基础》（核酸）、《生物的生殖和发育》（减数分裂、受精作用过程中DNA含量的变化）、《遗传和变异》以及“基因工程”打下较好的理论基础。 3.实验操作的关键：该实验成败的关键是提取。一则选材，鸡血细胞核DNA含量丰富且易得；再者，鸡血细胞很易吸水胀破。二则DNA的粗提取中必须通过几次准确的氯化钠浓度变化方可，否则提取的量不足。所以教师必须精心设计，认真组织，否则，实验难以成功。 ●教学目标 知识目标 识记：获得鸡血细胞的方法。 理解：（1）提取鸡血细胞核物质的方法； （2）提取含杂质较少的DNA的方法； （3）DNA鉴定的方法。 能力目标 1.理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力。 2.通过DNA的粗提取，培养学生的动手能力。 情感目标 1.通过小组成员相互配合实验，培养学生的合作精神。 2.通过实验结果，使学生树立生命的物质性。 ●重点·落实方案 重点 1.掌握DNA的粗提取与鉴定的技术。 2.理解各步骤中的实验原理。 落实方案 1.对每小组进行关键步骤的指导。 2.对每关键步骤的原理进行分析讲解。 ●难点·突破策略 难点 DNA的粗提取。 突破策略 1.板书DNA的粗提取程序和重要环节。 2.诱导学生理解各种溶液的用途或作用。 ●实验原理 1.DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 2.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 ●材料用具 材料 鸡血细胞液；预冷的95%的酒精溶液；蒸馏水；质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液；物质的量浓度分别为2 mol/L 和0.015 mol/L的氯化钠溶液；二苯胺试剂。 用具 铁架台、铁环、镊子、三角架、酒精灯、石棉网、载玻片、玻璃棒、滤纸、滴管、量筒、烧杯（不同大小）、试管、漏斗、试管夹、纱布。 ●做法指导 指导学生预习：结合教材的知识结构和实验目标预习该实验内容，从理论上掌握鸡血细胞的获取；鸡血细胞核物质的提取及纯化和鉴定方法。 指导学生提取：（1）让鸡血细胞在低渗溶液中吸水胀破，释放最多的DNA。（2）让DNA处在0.14 mol/L的氯化钠溶液中尽可能地析出。（3）用预冷的95%的酒精尽可能除去其他细胞物质，得到更纯化的DNA。 ●课时安排 1课时 ●教学过程 ［导课］ 1.为什么说DNA是主要的遗传物质？有何证据？ 2.科学家为什么把噬菌体作为研究DNA是遗传物质的材料？DNA存在于细胞的什么结构中？ 上节课，我们学习了DNA是主要的遗传物质，并通过实验证明了DNA是主要的遗传物质。在上节教材中，我们从理论上明确了DNA主要存在于细胞核的染色体上。本节课我们将通过实验对此给予证明。（出题：DNA的粗提取和鉴定） ［教学目标达成］ 1.板书：制鸡血细胞液（加抗凝剂）→获鸡血细胞（离心或静置）→获鸡血细胞核物质（提取→溶解→析出→溶解→析出）→鉴定DNA（用二苯胺） 指导学生按教材给出的具体步骤和板书的程序完成实验。指导过程中，要特别关注浓度这一关键因素。实验开始，教师要提供已经制备好的鸡血细胞液。 2.通过实验操作，获得鸡血细胞核物质。