高考生物 第3课时生物技术在其他方面的应用课件 新人教版选修1.pptVIP

【考情播报】 3年1考(2011·广东卷T5等) 1．常用的蛋白质分离方法 (1)凝胶色谱法： 　　蛋白质　比较 相对分子质量大 相对分子质量小 凝胶内部 不能进入 能进入 运动方式 垂直向下 垂直向下和无规则扩散运动 经过路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出 (2)电泳法原理： ①在一定pH下，蛋白质分子的某些基因解离后带上正电或负电，在电场的作用下，带电分子会向着与所带电荷相反的电极移动。 ②由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。 2．血红蛋白的提取和分离 (2)粗分离——透析(去除小分子杂质) (3)纯化——凝胶色谱法进行分离和纯化 (4)纯度鉴定——SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子质量 3．实验结果的分析与评价 项目 分析 血液样品的处理 ①分层明显→样品处理完成②分层不明显的原因： 凝胶色谱柱的装填 放一支与凝胶柱垂直的日光灯→直接检查加入大分子有色物质如蓝色葡萄聚糖—2 000或红葡萄聚糖，若色带均匀、狭窄、平整→装填成功 血红蛋白的分离 血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随洗脱液缓慢流出→分离成功 比较琼脂糖凝胶电泳和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 1．从载体上看，利用琼脂糖凝胶作为载体的是琼脂糖凝胶电泳，利用SDS—聚丙烯酰胺凝胶作为载体的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2．从依据上看，利用了分子带电性质差异和分子大小的是琼脂糖凝胶电泳，仅利用了分子大小的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。 3．从优点上看，琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需处理，电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率的影响，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。 4．(2013届银川模拟)红细胞中含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是(　　) A．血红蛋白提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行 B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液 C．粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质 D．可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 【解析】　蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定，提取和分离血红蛋白时，首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品处理；再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去，即样品纯化，纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后，配制成凝胶悬浮液，而不是用生理盐水；最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 【答案】　B 1．(2012·江苏高考)下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是(　　) A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增强DNA在NaCl溶液中的溶解度 B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 【解析】　洗涤剂可瓦解植物细胞膜，有利于释放DNA，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A错误；含DNA的丝状物应先溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，再用二苯胺试剂在沸水浴条件下检测，冷却后变成蓝色，B错误；常温下菜花匀浆中某些酶如DNA水解酶，其活性较高，会影响DNA的提取，C正确；用玻棒缓慢搅拌滤液可防止DNA分子断裂，但不影响DNA的提取量，D错误。 【答案】　C 2．(2011·广东高考)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是(　　) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 【解析】　 生理盐水和红细胞内的溶液为等渗溶液；各种细胞器和细胞核中都含有蛋白质，所以不含有细胞器和细胞核的红细胞内，蛋白质种类较少，提纯时杂蛋白较少；血红蛋白有颜色，所以在凝胶色谱法分离过程中易分辨，可用于监测；凝胶色谱法分离蛋白质，分子量较小的易进入凝胶内部，移动速度比较慢，故血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动快。 【答案】　D 3．(2012·江苏高考)下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是(　　) A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小 B．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药 C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用 D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌 【解