第4讲 酶的合成调节.docVIP

酶活力： 也称酶活性，酶催化一定化学反应的能力。 酶活力大小可用在一定条件下，它所催化的某一化学反应的起始速率V0表示，即用反应起始阶段产物增加(或底物减少)的速率表示。 二、酶活力单位 国际单位： 1961年国际生物化学与分子生物学联合会规定：在特定条件下，每 1 min 催化1 μmol 的底物转化为产物的酶量定义为1 个酶活力单位。这个单位称为国际单位（IU） 国际上另一个常用的酶活力单位是卡特（Kat）。在特定条件下，每秒催化1 mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特（Kat）。 1Kat = ？ IU 1IU = ？nKat 酶的比活力 酶的比活力是酶纯度的一个指标，是指在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。 酶活力：样品中酶总共有多少个酶单位。 比活力：每mg蛋白质中有多少个酶单位。 酶比活力＝酶活力（单位）/ mg （蛋白或RNA） 可用以比较每单位质量酶蛋白的催化能力。 对同一种酶，比活力可以代表酶的纯度，比活力愈高，表示酶愈纯。在酶纯化过程中，比活力增高。 例：13克酶粉溶于100毫升水中制成酶液，取该酶液5毫升与45毫升浓度为4mol/L的底物溶液混合，20分钟后混合溶液中底物的浓度为1mol/L，计算该酶粉1个酶活力单位相当于多少mg酶粉？该酶粉的酶比活力是多少？ 答案：1 IU = 0.1mg，该酶粉的酶比活力为10 IU/mg 三、酶的转换数与催化周期 酶的转换数（Kp），又称为摩尔催化活性（molar catalytic activity ），是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。即是每摩尔酶每分钟催化底物转化为产物的摩尔数。 Kp是酶催化效率的一个指标。通常用每微摩尔酶的酶活力单位数表示。单位为 min-1 转换数的倒数称为酶的催化周期。催化周期是指酶进行一次催化所需的时间。单位为毫秒（m sec）或微秒（μsec）。 酶活力的国际单位——无法律效力 实际应用中及商品酶制剂中，酶单位的定义较乱，要注意： 酶活力单位的定义和测定系统条件。 生产上多使用： 在（）条件下，每（s、min、h）催化（umol、g、mg）底物产生（1umol、mg、ug）产物所需要的酶量。 中温α-淀粉酶（GB8275-2009） ：1g固体酶粉(或1 mL液体酶)，于60℃、pH=6.0条件下，1h液化1g可溶性淀粉所需的酶量，即为1个酶活力单位，以u/g(u/mL)表示。 可溶性淀粉（湖州展望化学药业有限公司） 例如： 木聚糖酶： 某公司定义：在50℃，pH为6.50条件下，每分钟从浓度为10mg/mL的燕麦木聚糖溶液中释放1μmol还原糖所需要的酶量为一个活力单位（IU）。 夏盛：在50℃，pH=5.0的条件下，每分钟水解1mg/mL木聚糖产生1μg还原糖（以木糖计）所需酶量定义为一个酶活力单位（u）。 国家标准：饲用木聚糖酶GB/T23874-2009 在37℃，pH为5.50条件下，每分钟从浓度为5mg/mL的木聚糖溶液中释放1μmol还原糖所需要的酶量为一个活力单位（U） 第一篇 酶的生产 1、提取分离法 提取分离法是采用各种提取、分离、纯化技术从动物、植物的组织、器官、细胞或微生物细胞中将酶提取出来，再进行分离纯化的技术过程。 酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂中的过程。 酶的分离纯化是采用各种生化分离技术，使酶与各种杂质分离，达到所需的纯度，以满足使用的要求。 2、生物合成法 经过预先设计，通过人工操作，利用微生物细胞、植物或动物细胞的生命活动，获得所需的酶的技术过程。 据所使用的细胞种类不同，生物合成法可以分为微生物发酵产酶，植物细胞培养产酶和动物细胞培养产酶。自从1949年细菌α- 淀粉酶发酵成功以来，生物合成法就成为酶的主要生产方法。 生物合成法产酶过程：产酶细胞→细胞培养→代谢产物→分离纯化→酶。 3 、化学合成法 化学合成法是采用合成仪进行酶的化学合成，成本高，难以工业化生产。 用途：酶的人工模拟和化学修饰，对认识和阐明生物体的行为和规律，具有重要的理论意义和发展前景。 模拟酶是在分子水平上模拟酶活性中心的结构特征和催化作用机制，设计并合成的仿酶体系。 第二章 酶生物合成的基本理论 第三节 酶生物合成的调节 根据酶在细胞中的含量变化： 组成酶、适应酶（调节酶）、诱导酶 酶生物合成的调节控制：转录水平的调节、转录产物的加工调节、翻译水平的调节、翻译产物的加工调节和酶降解的调节等。 一、原核生物中酶生物合成的调节机制 转录水平的调节（基因调节） 定义：通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制，是在基因转录水平上进