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甲状腺功能低下大鼠大脑氨基酸、核酸及甲状腺激素的实验观察
甲状腺功能低下大鼠大脑氨基酸、核酸及甲状腺激素的实验观察
作者:李淑云 宋久存 于洪宇
【摘要】 目的: 探讨甲状腺功能低下(甲低功)大鼠大脑中的氨基酸、核酸、蛋白质及甲状腺激素(T3、T4)的代谢变化。 方法: 用0.5%(NaClO4)饮水复制甲低功大鼠模型,设实验组(NaClO4)和对照组(自来水),60天后处死,低温下取出大脑及甲状腺。使用氨基酸分析仪测定大脑氨基酸,放免法测定血清T3、T4, Lowry’s法测蛋白质含量。 结果: 甲低组大鼠血清T3、T4含量明显低于对照组(Plt;0.01),大脑谷氨酸(Glu)、Γ氨基丁酸(GABA)明显低于对照组(Plt;0.05),丙氨酸(Ala)、天冬氨酸(Asp)明显高于对照组(Plt;0.01),核酸(DNA/RNA)明显低于对照组(Plt;0.05),大脑中核酸蛋白质含量低于对照组(Plt;0.05)。 结论: 用NaClO4%复制甲低功大鼠大脑中的氨基酸代谢紊乱,可能影响蛋白质代谢和突触间的神经信息传递。
【关键词】 甲状腺功能; 氨基酸; 核酸; 甲状腺激素
本实验使用过氯酸钠(NaClO4)诱导大鼠造成大鼠甲状腺低功。过氯酸钠(NaClO4)和碘对甲状腺泵有竞争作用,造成甲状腺摄碘障碍,致使大鼠缺碘。近年来研究表明,缺碘大鼠和羊其脑蛋白明显降低,使大鼠脑神经纤维网发育不良和髓鞘形成落后。而在正常大鼠脑神经纤维网发育和髓鞘形成过程中,五羟色胺(5HT)、苯丙氨酸(Tyr)的变化与很多脑疾病有关[1]。De Guglielmone[2]报导新生鼠甲切后,脑内谷氨酸、谷氨酰胺和Γ氨基丁酸(GABA)暂时性减少,天门冬氨酸和丙氨酸发生永久性变化。国内外一些学者就缺碘对脑发育的影响进行了研究,特别是对形态学变化的研究较为深入。而对脑发育的生化研究,尤其对发育期大鼠大脑蛋白质、核酸和氨基酸的变化实验研究很少,有些结果很不一致。为探讨甲低功大鼠大脑生化指标的代谢变化,我们进行了实验研究,进一步为临床诊断甲状腺疾病的发病机理提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 动物及分组
锦州医学院实验动物中心提供的SpragueDawley(SD)雄性大鼠,体重(150~200g)。随机分为两组:甲低组(实验组)8只,饮含有0.5% NaClO4的自来水,饲以动物中心的标准固体复合饲料;对照组10只,饮自来水,60天后处死,无麻醉情况下迅速断头,低温下取甲状腺和脑组织。
1.2 实验方法
氨基酸用氨基酸分析仪测定,血清T3、T4采用中国科学院原子能研究所提供的放免试剂盒,大脑蛋白质含量的测定用Lowery法,核酸用紫外分光光度法。
1.3 统计学分析
应用SPSS10.0统计学软件进行分析,所有数据用±s表示,组间差异采用t检验, Plt;0.05为差异显著。
2 实验结果
2.1 甲状腺重量和血清T3、T4含量
甲低组大鼠甲状腺相对重量高于对照组,血清T3、T4含量则显著低于对照组(Plt;0.01),见表1。
表1 对照组、甲低组甲状腺重及血清T3、T4含量比较(略)
由表1可见,甲低大鼠甲状腺重明显高于对照组(Plt;0.05),血清T3、T4显著低于对照组(Plt;0.01)。
2.2 甲低组、对照组大鼠大脑氨基酸和蛋白质含量的比较
由表2可见,谷氨酸和Γ氨基丁酸与对照组相比明显降低(Plt;0.01),而天冬氨酸和丙氨酸较对照组显著高于对照组(Plt;0.01),脑蛋白质较对照组明显降低(Plt;0.05)。 2.3 甲低组、对照组大鼠大脑DNA、RNA和蛋白质含量的比较
表2 两组大鼠大脑氨基酸和蛋白质含量比较 (略)
注:与对照组相比,# Plt;0.01;* Plt;0.01;△ Plt;0.05。
表3 两组大鼠大脑DNA、RNA的含量和DNA/ RNA比值比较(略)
注:与对照组相比,# Plt;0.01;* Plt;0.01;△ Plt;0.05; △ △ Plt;0.01。
由表3可见,DNA和RNA与对照组相比明显降低(Plt;0.01),而脑蛋白质/ RNA比值较对照组降低(Plt;0.01),DNA/RNA比值较对照组低(Plt;0.05)。
3 讨论
脑组织中含有丰富的氨基酸,它们在神经系统中起着3方面的作用:① 氨基酸是蛋白质和多肽的合成成分或水解产物;② 与糖代谢有关;③ 有的游离氨基酸是神经递质,在突触传递和神经元及其它活动中具有特殊的作用[1]。近年来研究证实中性氨基酸(Γ氨基丁酸、甘氨酸、牛磺酸和丙氨酸)对中枢
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