第三章 生物细胞培养基灭菌设备（参考）.ppt

啤酒生产流程 粉碎机 冷却器 发酵罐 啤酒酿造流程 * 动画 * * 动画 压板 中间接管 支架 换热片 密封圈 冷热流体进出管 （1）、板式换热器 压板 中间接管 支架 换热片 密封圈 冷热流体进出管 1、板式换热器的组成 优点：灭菌的温度较高，灭菌时间较短，培养基的营养成分受破坏的程度较低，从而保证了培养基的质量；设备的利用率高； 缺点：过程所需的设备较多，操作较为麻烦，染菌机会也相应较多 5. 连续灭菌流程特点 连续灭菌优点： （1）提高产量； （2）产品质量较易控制； （3）蒸汽负荷均衡，锅炉利用率高，操作方便； （4）适宜采用自动控制； （5）降低劳动强度。 实际操作： 高温灭菌时间约为15~30s，然后根据发酵类型不同在维持罐维持8~25min。 在发酵罐中进行实罐灭菌，是典型的分批灭菌。 全过程包括升温、保温、降温三个过程 第四节 发酵罐实罐灭菌操作要点 升温阶段将培养基从室温加热到灭菌温度,两种方式: 用蛇管或夹套用蒸汽间接加热(到90℃),再直接通入培养基至灭菌温度 直接通入活蒸汽 10立方发酵罐(7吨培养基) 升温需1.6吨蒸汽, 保温需0.5-0.8吨蒸汽 1、孢子热死亡的规律符合 升温 保温 冷却 因为升温、冷却阶段T是时间t的函数，K不是常数，所以： Kh-保温阶段的孢子比热死亡速度常数 温度随灭菌时间的变化 培养基的间歇灭菌就是将配制好的培养基放在发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过 程，通常也称为实罐灭菌。 间歇灭菌过程包括升温、保温和冷却等三个阶段，图5—7为培养基间歇灭菌过程中的温度变化情况。 2、分批灭菌的灭菌常数 通常以耐热芽孢杆菌为对象， 其热死灭活化能为67930 K/mol, A=1.34×1036 1/秒, R=1.987K/mol, e=2.718,为灭菌温度的单一函数，计算如下式: lgk = -14845/T + 36.127 3、计算举例--理论灭菌时间 某发酵罐内装培养基40m3,在121℃下进行分批灭菌，设每毫升培养基中含耐热的芽孢为107个，求理论灭菌时间？ （分批灭菌的灭菌常数 lgk=-14845/T + 36.127） 解：N0= 40×106×107=4×1014 N=0.001 lgk=-14845/T + 36.127 =-14845/(273+121)+36.127 =-1.55 k=0.0281 s -1 t= 1/k lnN0/N = 1/0.0281 ln4×1014/0.001 =1442.6 s =24 min 4、分批灭菌--实罐灭菌操作要点 设备严密度 温度与气压是否对应。 培养基及发酵设备的灭菌包括 分批灭菌（也称实罐灭菌或实消）、 空罐灭菌（空消）、 过滤器及管道灭菌等。 分空气过滤器灭菌 并用空气吹干 夹套或蛇管排冷水，开启排气管阀，空气管通蒸汽，也可夹套内通蒸汽 达70℃左右 取样管 放料管 通蒸汽 120℃，1×105pa 保温 保温阶段，凡液面以下各管道都应通蒸汽，液面上其余各管道则应排蒸汽，不留死角，维持压力、温度恒定 罐压接近空气压力 向罐内通无菌空气 保温结束，依次关闭各排汽、进汽阀门 夹套或蛇管中通冷水 培养基降温到所需温度 分批灭菌（实罐灭菌） 1.灭菌工艺过程 灭菌流程（三路进气、四路出气） 与罐相连的分空气过滤器用蒸汽灭菌并用空气吹干。 将输料管路内的污水放掉冲净，培养基泵送至发酵罐（种子罐或料罐）内，同时开动搅拌器进行灭菌。 灭菌前先将各排气阀打开，将蒸汽引入夹套或蛇管进行预热，待罐温升至80~90℃，将排气阀逐渐关小。 三路进汽：直接蒸汽从通风、取样和出料口进入罐内直接加热，直到所规定的温度，并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进气”。 * 四路出汽：直接蒸汽从排气、接种、进料和消沫剂管排气 分批灭菌设备示意图 总蒸汽管道压力要求不低于0.3-0.35Mpa，使用压力不低于0.2Mpa。 空消： 一般维持罐压0.15~0.2Mpa， 罐温125~130℃， 保持30~45min； 将蒸汽从进气口、