食品中其它化学污染物的检验（参考）.ppt

（二）N-亚硝基类化合物的检验方法 GB/T 5009.26-2003 气相色谱-热能分析法 气相色谱-质谱联用法 分光光度法 测定方法 第一法 气相色谱-热能分析法 1、原理 样品经处理后，经气相色谱分离，分离后的亚硝胺在热解室中经特异性催化裂解产生NO基团，后者与臭氧反应生成激发态NO﹡。当激发态NO﹡返回基态时发射出近红外区光线（600nm~2800nm）,产生的近红外线区光线被光电倍增管检测（ 600nm~800nm），以保留时间定性，峰面积或峰高定量。 2、仪器 气相色谱仪 热能分析仪 玻璃层析柱：带活塞 8mm内径，400mm长 减压蒸馏装置 K-D浓缩器 3、样品处理 （1）提取 ①硅藻土吸附法：取已经除去二氧化碳的适量样品，加一定量的氢氧化钠和N-亚硝基二丙胺内标溶液混匀后装入填有Extrelut层析柱柱顶，平衡10-15min后，用二氯甲烷直接洗脱提取； ②真空低温蒸馏法：在双颈蒸馏瓶中加入适量预先去除二氧化碳的样品、玻璃珠和氢氧化钠,在真空低温条件下蒸馏至干为止；然后在蒸馏液中加稀盐酸，用二氯甲烷提取3次，提取液用无水硫酸钠脱水。 （2）浓缩 将二氯甲烷提取液移入K-D浓缩器中,在55℃水浴上浓缩至10ml，再以缓慢的氮气吹至0.4-1.0ml，供测定。 4、测定 仪器条件： 气相色谱条件： 气化室温度：220℃ 色谱柱温度:175℃，或从75℃以5℃/min升至175 ℃后维持； 色谱柱：内径2mm-3mm，长2m-3m玻璃柱或不锈钢柱， 内装涂以固定液质量分数为10%的聚乙二醇20mol/L和KOH（10g/L)或质量分数为13％的Carbowax 20M/TPA于载体Chromosorb WAW-DMCS(80目－100目） 载气：氩气，流速20-40mL/min 热能分析仪条件 接口温度：250℃ 热解室温度：500℃ 真空度：133Pa-266Pa 冷阱：用液氮调至－150℃ 测定方法： 按照参考的仪器设定条件设置好参数，分别注入样品浓缩液和N-亚硝胺标准工作液5μl-10μl，利用保留时间定性，峰高或峰面积定量。 5、方法说明 本标准适用于啤酒中N-亚硝基二甲胺含量的测定； 热能分析仪的最低检出量是0.1ng; 二氯甲烷提取液在浓缩时，温度不宜太高，水泵压力不宜太猛，以免损失亚硝胺； 试剂二氯甲烷，每批取100mL在水浴上用K-D浓缩器浓缩至1mL，在热能分析仪上无阳性反应，否则需经全玻璃蒸馏装置重蒸后再试，直至阴性。 (第二法）气相色谱-质谱联用法 1、原理 样品中的N－硝基胺类化合物经水蒸气蒸馏和有机溶剂萃取后，浓缩至一定量，采用气相色谱－质谱联用仪的高分辨峰匹配法进行定性和定量。 2、仪器 水蒸气蒸馏装置 K-D浓缩器 气相色谱－质谱联用仪 安捷伦气相色谱-质谱联用仪 3、样品处理 (1)水蒸气蒸馏 称取一定量粉碎的样品，加入适量水和氯化钠，进行水蒸气蒸馏；蒸馏液收集在加有二氯甲烷和少量冰块的接收瓶中，利用亚硝胺类的挥发性，与其它干扰组分分离。 加氯化钠是为了减低N-亚硝胺在水中的溶解度，使之更容易蒸发 （2）萃取 在蒸馏液中加入氯化钠（促使分层）和少量硫酸（避免样品中碱性杂质进入有机相），使待测物转移到二氯甲烷层，再用二氯甲烷萃取三次，合并萃取液。 （3）浓缩 将二氯甲烷萃取液用无水硫酸钠脱水后，转移到K-D浓缩器中，在50℃水浴上浓缩至1.0mL，备用。 4、测定 在设定好的测定参数下，将样品和N-亚硝胺标准溶液注入到气相色谱仪中，经气相色谱柱分离后，进入质谱仪，采用电子轰击源高分辨峰匹配法，结合保留时间来定性，以该分子、离子的峰高来定量。 5、方法说明 本法适用于酒类、肉及肉制品、蔬菜、豆制品、调味品、茶叶等食品中N－亚硝基二甲胺、N－亚硝基二乙胺、N－亚硝基二丙胺和N－亚硝基吡咯烷含量的测定； 样品中含较高浓度的乙醇，如蒸馏酒、配制酒等，须用氢氧化钠溶液洗涤有机相，以消除乙醇的干扰。 （一）概述 （二）食品中苯并(α)芘的检验方法 三、食品中苯并(α)芘的检验 （一）概述 苯并(α)芘的性质 食品中苯并(α)芘的污染来源 苯并(α)芘对人体的危害 苯并(α)芘的性质 苯并芘又称 3，4-苯并芘，是一种由五个苯环构成的多环芳烃。 常温下为浅黄色针状结晶，性质稳定，微溶于水、乙醇、甲醇，易溶于环己烷、己烷、苯、丙酮等有机溶剂。 在有机溶剂中，用波长365nm紫外线照射时，可产生典型的紫色荧光。苯并芘在碱性条件下较稳定； 在常温下不与浓硫酸作用，但能溶于浓硫酸；能与硝酸、过氯酸、氯磺酸起化学反应。 　 食品中苯并(α)芘的污