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细说新型乙酰胆碱酯酶抑制剂的设计与合成 　　阿尔茨海默病 (Alzheimers disease, AD) 是以大脑中beta;-淀粉样蛋白老年斑 (SPs) 沉积、神经纤维缠结 (neurofibrillary tangles, NFTs) 和突触及神经元缺失为特征的一种疾病, 已经成为威胁现代社会老年人健康的重大疾病之一。根据国际阿尔茨海默病协会2011 年公布的调查结果显示, 全球约有3 650 万人患有AD, 且患病率随年龄增长而增加。 　　目前研究发现, AD 主要具有3 种特征性的病理表现: 神经传递基质乙酰胆碱水平的降低、患者大脑小半鞘翅中beta;-淀粉样蛋白增加和Tau 蛋白 (含量最高的微管相关蛋白) 的过度磷酸化。科学家们一直都在试图通过对以上3 种主要病理特征的深入研究来找到AD 的病因及治疗策略。针对神经传递基质乙酰胆碱水平的降低, 科学家提出了著名的胆碱能假说 (cholinergic hypothesis), 即胆碱能系统的改变与AD 的认知功能的损害程度密切相关。乙酰胆碱酯酶抑制剂通过抑制AChE 与乙酰胆碱 (ACh) 的结合, 从而提高脑内ACh的含量来改善AD患者的中枢神经胆碱功能。临床上治疗AD 以乙酰胆碱酯酶抑制剂为主, 如他克林 (tacrine)、多奈哌齐 (donepezil)、利斯的明 (rivastigmine) 等。针对beta; 淀粉样蛋白 (Abeta;)的沉积和Tau 蛋白的过度磷酸化, 科学家提出“淀粉样级联假说”, 即beta;-淀粉样蛋白处于AD 病理发生的早期, 其沉积导致淀粉样斑块的形成, 而NFTs 会引发tau 蛋白磷酸化和神经纤维缠结, 最终引起突触功能障碍、神经元丢失、退化甚至痴呆。针对消除beta; 淀粉样蛋白 (Abeta;) 沉积的研究策略主要包括以下两种: 一是设计Abeta; 蛋白分泌酶的抑制剂, 主要是beta;-分泌酶的抑制剂; 其次是运用免疫学的方法制备Abeta; 的特异性抗体对其进行识别以减少Abeta; 的沉积。针对Tau 蛋白的过度磷酸化, 主要的治疗策略分别为设计相应的蛋白激酶抑制剂和作用于高磷酸化Tau 蛋白的脱磷酸化的磷酸酯酶激活剂。目前, 基于以上的治疗策略所设计、开发的药物, 只有AChE 抑制剂已经取得成功并广泛应用于临床。但是, 这些已开发的药物还不能满足我们的实际需求, 需要继续开发新的药物来满足社会的需求。近来报道了一个化合物Ⅰ, 它可以与NFTs 的积累发生相互作用, 而这类化合物对乙酰胆碱酶活性是否有抑制作用还未见文献报道。 　　本文在化合物Ⅰ的化学结构基础上, 将A 部分的苯并噻唑开环变成了苯基噻唑, 同时将B 部分偶氮基团换成了酰胺基团并且延长了碳链, 而且将C部分延长了碳链和变换了取代基, 从而得到了一系列全新结构类型的2-氨基-4-苯基噻唑类化合物Ⅱ, 并初步考察这些化合物是否对乙酰胆碱酯酶具有体外抑制活性。2-氨基-4-苯基噻唑类化合物的合成如合成路线。 　　结果与讨论 　　1 目标化合物的合成 　　合成的化合物结构经1H NMR、MS、元素分析及IR 得以确证, 理化数据。 　　2 乙酰胆碱酯酶抑制活性 　　合成化合物的体外AChE 抑制活性实验表明, 制备的14 个化合物均有一定的体外抑制乙酰胆碱酯酶的活性。其中8a 表现出较好的AChE 抑制活性, 其IC50 = 3.54 mu;mol·Lminus;1, 其活性高于对照药利斯的明, 但低于对照药多奈哌齐。从合成的化合物的活性数据可以发现不同取代基与生物活性的部分相互关系如下: 在A 处 ,苯环上R1 取代基对生物活性的影响: H、Cl、OCH3的活性依次增强, 例如表2 中化合物的IC50 活性大小为: 7a (R1=OCH3) gt; 6a (R1=Cl) gt; 5a (R1=H)。在B处, 酰基碳链R2 上多了一个碳原子, 抑制酶的效果明显增强, 8a (R2=CH2CH2) gt; 4a (R2=CH2), 说明酰胺N上碳链的长短对抑制活性起着重要的影响; 在C处, R3 上的取代基用丙基代替乙基, 活性减弱, 如4a(R3=(CH2)2) gt; 5a (R3=(CH2)3)。在D 处, 叔胺上的R4取代基二甲氨基对生物活性的影响要比二乙氨基大,如4a (R4=CH3) gt; 4b (R4=CH2CH3)。 　　3 乙酰胆碱酯酶抑制机制 　　从反应速率V-底物浓度可以发现:同一抑制剂浓度, V 随着[S]的增加而变大; 同一[S],V 随着抑制剂浓度增加而变小。根据酶促动力学特点, 竞争性抑制类型的双倒数曲线交于X 轴的负半T轴上; 非竞争性抑制