磷酸甘露糖异构酶基因选择标记遗传转化系统的研究.pdfVIP

摘 要 转基因植物是把外源基因整合到植物基因组中。转基因植物中，除整合有外源目的基 因序列外．同时还整合有启动子，载体骨架序列和抗生素标记基因等非日的基因DNA片 断。随着对转基因植物生物安全研究的不断深入，这些非目的基因序列的生物安全问题也 引起了广泛关注。 本论文从克隆甘露糖异构酶基因，构建含有GFP基因的安全选择系统植物表达载体 和含有抗病基因的安全选择系统植物表达载体及对杨树的遗传转化等方面对抗病杨树的 安全选择标记系统进行了研究，主要的研究内容有以下几个方面： 1本实验成功的克隆了编码6-磷酸甘露糖异构酶基因，将其作为选择基因，构建到 转化芽的植物表达载体pMBIAl301-manA。 全选择标记基因的植物表达载体上。 3通过对烟草和杨树甘露糖敏感性测验结果发现：烟草不能用此转化系统进行筛选。 杨树可以用并得到较适合的杨树筛选培养基：甘露糖8e；，1和蔗糖229，l。 deltoidcsx 4以美洲黑杨x小叶杨(Populus 中，且转基因分化芽能够在甘露糖培养基上生长。 关键词：6．磷酸甘露糖异构酶基因；选择标记；杨树；基因克隆；遗传转化 Abstract forthe withouttheUSeofantibioticsor Anewmethod selectionoftransgenicpopularplants herbicideshasbeen mannoseitselfhasnoadverseeffectson developed．Although plantceils，it 1eadstoanaccumulation intracellularstoresof ofmannose．6．phosphate．whichdepletes allinhibitioncell selectionnses inorganic resultsin growth．Thesystem phosphate．Tllis ofplant theEscherichiacoli thatencodes isomerase pmigene phosphomannose the carl conversionto detoxify by plantscarryingpmigene man／lose·6-phosphate imermediateof thePMI differfrom fructose·6-phosphate，allglycolysis，viaactivity．They conventionalselection as arebasedon the cellswi也 transgenic techniquesthey supplementing ametabolic mtherthan the cells．In new advantage manycases，these killingnon-transgenic