HPLC法同时测定生发片中二苯乙烯苷和特女贞苷的含量.docVIP

HPLC法同时测定生发片中二苯乙烯苷和特女贞苷的含量 　　【摘 要】 目的：建立HPLC同时测定生发片中二苯乙烯苷和特女贞苷含量的方法。方法：样品用70%甲醇超声提取。色谱柱：Inertsil ODS-3-C18（5μm，250mm×4.6mm）；流动相：乙腈-水（17∶83）；检测波长：224nm；流速：1.0ml/min；进样量：10ml。结果：二苯乙烯苷在0.01618～0.2426mg范围内线性关系良好（r=0.9999），平均加样回收率为100.1%（n=6），RSD=1.84%；特女贞苷在0.0816～1.224mg范围内线性关系良好（r=0.9998），平均加样回收率为100.6%（n=6），RSD=1.38%。结论：本方法简单、准确，可作为生发片的质量控制方法。 　　【关键词】 生发片；二苯乙烯苷；特女贞苷；高效液相色谱法；含量测定 　　【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）12-0011-03 　　Abstract：Objective To determine the content of 2，3，5，4′-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-gluco side and Specnuezhenide in Shengfa Tablets by HPLC. Methods Samples were extracted by 70%methanol ultrasonic，then analyzed on the Inertsil ODS-3-C18（5μm，250mm×4.6mm）with the mobile phase acetonitrile-water（17∶83）. Detect wavelength was 224nm，f-low rate was 1.0ml/minand injection volume was 10ml.Results The linear range of 2，3，5，4′-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-glucoside was 0.01618～0.2426mg（r=0.9999），and the average recovery was 100.1% with RSD of 1.84%（n=6）. The linear range of Specnuezhenide was 0.0816～1.224mg（r=0.9998），and the average recovery was 100.6% with RSD of 1.38%（n=6）.Conclusion The method is simple and accurate for the quality control of Shengfa Tablets. 　　Keywords：Shengfa Tablets；2，3，5，4′-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-glucoside；Specnuezhenide；HPLC；determination of content 　　生发片收载于《中药成方制剂》第十七册[1]，由何首乌、女贞子、山药、黑枣、黑豆、茯苓、牡丹皮、地黄、墨旱莲、泽泻、桑葚、麦冬12味中药组成，具有滋补肝肾、益气养血、生发乌发之功效，主要用于肝肾不足、气血亏虚所致的头发早白、脱落、斑秃、全秃和脂溢性脱发。二苯乙烯苷是何首乌特有的生物活性成分[2]，研究表明二苯乙烯苷能够诱导小鼠 B16 细胞色素沉着[3]，并且通过诱导休眠毛囊进入生长期促进头发的生长[4]。特女贞苷是女贞子中重要的水溶性活性成分[5]，女贞子水煎剂能增强小鼠毛囊肝细胞生长因子（HGF）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA的表达，对体外培养的小鼠触须毛囊有明显的促生长作用[6-7]。生发片原标准中只有还原糖的鉴别，无含量测定项，为了更好地控制生发片的质量，研究采用HPLC同时测定了本品中二苯乙烯甘和特女贞苷含量。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 Agilent 1200高效液相色谱仪（VWD检测器，Agilent1200化学工作站）；赛多利斯BSA224S-CW型电子天平（精确度为十万分之一）；SB-4200 DTD超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；HH-4数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）。 　　1.2 材料 特女贞苷对照品（批号：111926-201404）、2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品（批号：110844-201512）购自中国食品药品检定研究院；生发片（批号：1512079 T家）；乙腈为色谱纯；水为超纯水；其他试剂为分析纯