GCMS测定动物组织中四种β2兴奋剂.pdfVIP

第25卷增刊 分析测试学报 VoL25 FENXICESHI ofInstrumental Nov．2006 2006年11月 XUEBAO(JournalAnalysis) GG—MS测定动物组织中四种JB2一兴奋剂 王 炼1”，杨 元1，高 玲1，李 阳2 (I．成都市疾病预防控制中心，四川成都610021；2．四川大学华西公共卫生学院，四川成都610041) 家畜饲养过程中，为提高抗病能力，过量加入或是在动物明令禁止添加的生长期时期加入卢：一兴奋 剂，研究表明食入过量卢：一兴奋剂轻则导致心跳及心律不正常，严重者则可引发心脏病。 目前国内外用GC分析卢：-兴奋剂的方法较多，GC分析2-兴奋剂一般采用质谱(MS)或二级质谱 (MS／MS)做检测器，由于这类药物结构中含有一OH、一NH：等极性基团，且高沸点、难挥发，因此 必须通过衍生化才能进行GC—MS分析。卢：一兴奋剂衍生化的反应主要有：①酯化(七氟乙酰酐、乙酸 酐)；②甲基硼酸和丁基硼酸化；③硅烷化本试验采用99％BSTFA一1％TMCS作为衍生化试剂。 1 实验部分 1．1试剂与仪器 HP6890Gc／5973Ms气相色谱一质谱仪，其余试剂及仪器设备详见方法。 1．2样品前处理 ①含蛋白、脂肪少的样品(肾、肺、牛肉)的处理：取10．og样品于50mL离心管中，加入15 mL pH5．2的HAc—NH。Ac缓冲液，混匀，加入helixpotamia(酶)，37。C恒温箱中保持2h，加入1％ 000 的高氯酸10mL，混匀后过滤，将滤液离心(4r／min，5 mL烧杯中，调 min)，将上清液转移至50 节pH为3．0，过C．。一SCX串联固相萃取小柱，试液过完后，干抽3min，用色谱纯甲醇5mL洗脱并 干抽3 mL洗脱并收集，70E水浴氮吹仪吹干，加入25 min，取下上层的C。。小柱，用4％的氨化甲醇5 min，上机测定。② 止衍生化试剂(99％BSTFA—l％三TMCS)，25灿乙酸乙酯，80℃水浴反应30 mL 含蛋白、脂肪多的样品(猪肉、肝、鸡肉)的处理：取10．0 mL离心管中，加入15 g样品于50 pH mol／L 5．2的HAc—NH。Ac缓冲液，混匀，加入helixpotamia(酶)，37℃恒温箱中保持2h，加入11．7 000 的高氯酸10mL，混匀后过滤，将滤液离心(4r／min，5min)，将上清液转移至分液漏斗中，分两 次加入乙酸乙酯一异丙醇(体积比6：4)各30mL萃取，合并提取液，50。C条件下旋转蒸发仪蒸干， 0．0l mol／L的KH2PO。溶液溶解残渣，过C18一SCX串 联固相萃取小柱，后面步骤同上。 1．3色谱与质谱条件 色谱柱：30mX0．25mmX0．25斗mHP一5MS；进 样口温度：280℃；载气：高纯氦气1．0mL／min；进样： 不分流1trL。 质谱条件：电子轰击(EI)离子源；接口温度 280℃；电子能量70eV；溶剂延迟：5．5min；选取特征 6．007．008．009．0010．0011．0012．0013．00 离子对4种药物进行定性。