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20 2005海峡两岸植物生理与分子生物学教学研讨会论文集 介绍拍摄几种植物器官运动的方法 王 忠。顾蕴洁成勤勤钱善勤李运祥 (扬州大学农学院扬州市225009) 在植物学和植物生理学研究中，常常需要把植物器官、组织和细胞运动的过程连续拍摄下来。 一组完整的动态照片比单张静态照片蕴含的信息多，可省去许多文字描述，使人们对植物器官、组 织和细胞的运动过程一目了然。近年来，我们摸索了在显微镜、或解剖镜下用显微摄影装置(含数 码相显微摄影装置)定时定点拍摄气孔开闭、颖花开闭、浆片膨大和花粉萌发的技术，另外还探讨 出了用扫描仪录入稻穗开花过程和拍摄稻根负向光性生长的方法。现介绍如下。 1气孔开闭的拍摄 1．1 原理将植物叶片置于光下，气孔即慢慢开启，将叶片置于暗中，气孔则渐渐关闭。气孔的形～ 态，大小及开度情况在显微镜下可直接观察和拍摄。 1．2方法待观察的叶片先放在暗中，气孔关闭后，将叶片固定在显微镜的载物台上，有气孔的一 面朝上。用显微镜本身光源作为诱导气孔开启的光照，通过改变光源灯电源电压或调节视场光阑和 孔径光阑的大小来调节视场 亮度，即视野中叶片的受光照 度。也可在叶片斜上方放一聚 光灯(最好为冷光源)作辅助 光源，通过移动光源灯与所观 察叶片部位的距离也可调节 辅助光的光照度。视野中选择 数个气孔，调焦后，每隔5min 拍摄一次，直至气孔全开。放 大倍数：物镜：lOx，或20x； 环境温度：25℃左右。若进一 步拍摄气孔关闭，只要把光源 灯关闭即可，仅在拍摄时开一 下灯。 1．3实例图1是按上述方 法拍摄紫鸭跖草的气孔开闭 过程。从中可以看出，植物气 孔的开闭有个过程。通常光诱 导的气孔开启有半小时左右 的滞后期，即在照光半小时后 叶片上的气孔开度才能达到 最大；另外断光后的气孔关闭 也有半小时左右的滞后期。 图1紫鸭跖草的气孔开闭 1～6为光照下的气孔开启，7～12为断光后的气孔关闭。每隔5min拍摄一次 1．4注意事项①选择叶平整、气孔大的植物，如鸭跖草，蚕豆等，拍摄效果好。②选用叶片要带 茎，并把茎插在水中，以供叶片水分。③叶面若有灰尘或脏物可事先用水冲洗。④视野中的气孔在 同一平面上。 +资助： 国家自然科学基金项目30070454) 2005海峡两岸植物生理与分子生物学教学研讨会论文集 2l 2稻颖开闭的拍摄 2．1原理C02能诱导水稻浆片的吸水膨大，从而对水稻颖花的开启有显著的促进效应㈩，CO 2促 进开颖的过程类同自然开颖，开过颖的颖花随浆片失水会自行关闭。因此对离体稻穗或颖花进行CO 2处理，在解剖显微摄影装置下能观察与拍摄其开闭颖过程，此过程也可用带近摄镜的照相机拍摄。 2．2方法在离水稻正常开花前1小时从田问剪取稻穗，将穗茎养护在水中。观察时把稻穗放在 5％的CO2气体或饱和CO2水溶液中， 2min后取出。选择一朵当天要开的颖花， 将其平悬放在解剖显微镜的载物台上方， 或置于带有近摄装置的照相机镜头下，斜 上方有光源灯照射颖花，对焦后，在颖花 开闭过程中每隔5～lOmin拍摄一次。环 境温度30℃左右，曝光时间随光强而定。 2．3实例图2是按上述方法拍摄的水 稻颖花开闭过程。经CO 2处理过的稻穗， 在30℃温度下，籼稻约过lOmin，粳稻约 过15min后开颖。单朵颖花开闭整个过程 约在2h左右，其中颖花从始开到全开约 半小时，开颖最大角维持时间也在半小时 左右，闭颖开始至颖花完全闭合需1时左 右。从图还可以看出，开颖过程中花丝伸 长，柱头偏上生长而外露。 图2由C02诱导的水稻颖花开闭过程 品种为籼优63，每隔5分钟拍摄一张。1～7为． 开颖阶段，7～12为开颖角度最大维持阶段， 12～22为闭颖阶段 2．4注意事项①开颖快慢受温度影响，环境温度高时，开颖较快，闭颖早。@co2促进开颖的效 应只有对发育成熟的颖花才有效果。③