对称性Boc—苏氨酸卟啉光谱探针测定蛋白质的研究.pdf

第28卷，第10期 光谱学与光谱分析 Vbl．28。卜№．10。pp345—346 2OO8年1O月 and Analysis ()ctober，2008 SpectroscopySpectral 对称性Boc一苏氨酸卟啉光谱探针测定蛋白质的研究 蔡燕燕，李 茹，赵燕芳，陈 欣，朱沛华，魏 琴’ 济南大学化学与化工学院，山东济南250022 最佳显色条件下测得BSA的线性范围为O．02～9．oo馏·mL～，相关系数o．9829，检测限o．017馏· lnL-。。此法抗干扰能力强，有较好的选择性和灵敏度，用予实际样品奶粉的测定，结果满意。 关键词TAPP-TbB0c；蛋白质；荧光光谱探针 中图分类号：()644．1文献标识码：A 文章编号：1000-0593(2008)10-0345一02 在生物体系中，蛋白质是必不可少的生命物质，有关血 使用不同的胶束，考察它们对体系的影响。增敏效果 x-101’wee卅 清蛋白与各种荧光探针之间相互作用的研究是目前生命科 为：AOT胶束Tritonx-100胶束Triton 学、化学和临床医学中共同关注的课题[1-5]。本文利用荧光 光谱研究了TAPP-n廿Boc作为光谱探针被用于蛋白质的测系选用1．2Ⅱ塔·nlL_1A()T胶柬作为最佳介质。所选的 1．20 定及应用中。 nlg·mL-1AOT胶束浓度处于A(玎临界胶束浓度 TAPP_Th卜B0c_BSA体系的荧光激发及发射光谱。可以 看出：在发射峰657呦处，TAPP-Thr-B0c自身的荧光强度 中性环境下所形成的复合物增溶于胶柬内核，这样胶束起到 较弱。当BsA加入时，荧光猝灭程度很微小，缓冲液的加入 了增溶增敏的作用。另本体系选定3．O×10_5rI】01．L-1的卟 也无法增加荧光猝灭强度。但是，当AOT胶束加入时， 啉浓度进行测量。 TAPP-Thr-Bc盱BSA体系的荧光猝灭程度明显增强，伴随着改变试剂加入顺序发现：缓冲液，胶束，BsA，TAPP- 发射峰位于657和725衄处，对应于两个过渡区域。BSAThr-Boc的顺序能收到较好的效果，因为缓冲液的先加入营 的加入可以显著猝灭缓冲液一A()，r_TAPP-Thr_B0c体系的荧 造了一个微酸性环境，有利于卟啉和BSA产生较强的结合 光强度，这表明了在近中性缓冲环境下，BSA，A()T胶束， 效果，而胶束可以起到增敏的作用。该体系在最佳条件下的 T触’PThr-B0c之间发生了反应。随着BsA加入量的增加， 结合反应在10min内△IF达到最大，且在1．5h内变化不 体系荧光强度不断猝灭，且当BsA浓度在一定范围内时两 大。本实验选择最佳稳定时间为10111in。离子强度对体系影 者呈线性关系，则表明表面活性剂、缓冲溶液的存在能对T 响较大，这表明蛋白质与TAP弘Thr-Boc之间主要以静电引 (3一M04HP)P．zn卟啉的荧光强度产生影响且它们之间发生力相结合，所以离子强度对体系有着较大的影响，这可能是 了反应。 由于盐离子与水分子的作用机会增大，破坏了蛋白质分子表 按实验方法进一步进行条件性选择实验。选定1．30玎也 面的水化层。 BR 111L