生物发光及化学发光在生物医学领域中应用的进展.pdfVIP

生物暂理学报 第十六卷 第一期 二0o0年三月 ACTA BIoPⅡYSICA SINICA Vo1．16 No．1 Mar．20O0 0 F～』8 生物发光及化学发光在生物医学领域中应用的进展 翅盎盎 盘幻 (北京医科大学^民医院 北京 100034 R 51 摘 要 生物发光和化学发光在生物医学领域内的应用主要包括细胞学栓洲、分子生物学、卫生擘检 剥、生特传感嚣、脂质遣氧化检洲和药物筛选等六十方面。其中细胞学检剥主要是利用细胞 内ATP 导致的虫荧光素酶生物发光进行活细胞计敷．目前已实现快速、动态、单细胞分析；同时也发现丁一 些新的与生物或化学发光有关的细胞学指标。分子生物学领域内的应用主要为报告基因和分子杂 交，近年采又有人推出了生物发光实时DNA测序技术。卫生学检洲尉主要是剁用分子杂交或ATP 导致的生物发光检测擞生抽污染。基于生抽度化学发光的生物传感嚣主要有三类：酶固化传卷嚣、 免疫分子传感嚣和特异调控因子谤导的报告基因传卷嚣。脂质过氧化检洲主要是括刺用化学发光 检剥自由基等活性物质。最近还有人分剐推出了基于报告基因和细胞增殖的生物发光药物筛选系 统。 抽 董 1． 赴用 … 美蕾词：生盐塞毒；些兰生垄 ATP；报告基目；生物件感嚣：DNA洲序 鐾 必 ， 中圈分类号：Q632 文献标识码：A 文章编号：1000—6737(2000)01—0010—09 生物发光(BE)及化学发光(CL)作为两个古老而又年轻的技术，近二十年来得到了很大 的发展，尤其在生物医学领域得到了广泛的应用，已成为现代生物技术的一个组成部分。特别 是发光免疫分析技术及荧光素酶报告基因的应用，已逐步形成一个产业 。而近几年来，由于 在某些关键技术，如生物传感器13 、基因序列分析 I、活体细胞ATP测定 ‘等方面取得了 ～ 些突破，其应用范围更进一步扩大，几乎涵盖了生物医学的各个领域。本文就此做一粗浅的 回顾。 1 细胞学检测中的应用 由于 ATP是维持细胞存活的基本物质，因此利用 ATP启动的虫荧光素酶 BL测定样品 中的活细胞数，或者检测细胞的增殖是 BL在生物学中的应用领域之～。近年来，在该领域内 的应用研究又有一些进展。例如用于测定T细胞免疫活性 等。另外，还有人将该技术用于尿 样中的细菌总数快速测定，与培养法比较，阳性预测值可达 98％以上；临床随访数据也证明其 与尿路感染有很好的相关性 (灵敏度：100％，特异性：80％，阳性预测值：45％，阴性预测值： i00％)，可作为一个临床上对于尿路感染的早期筛选指标之一}9 0。RL Price等将上述方法作 了I一些修改，利用细菌崩解时释放的腺苷激酶将 ADP转化为ATP．从而利用 BL测定细菌的 降解，以建立可在一小时内完成的快速药敏实验方法 稿 日期 ：1999—05～31 作者茼介：柄晓韩，副教授，硕士，电话E mail：ylahang@pubhc bta[1et cn 第 1期 生物发光及化学发光在生物医学领域中应用的进展 1l 通常情况下，细胞内ATP的测定需要将细胞膜破坏以释放 ATP，但这无法对单个活细胞 内 ATP进行连续的动态实时检测 Brau和Squirrel1分别通过微注射 及基因重组技术 。 将荧光紊酶导人细胞内，从而利用 BL实现了单个活细胞内 ATP的连续动态实时检测。 除BL以外，CL也可用于细胞活性的测定。如 Dorohina等将人外周血白细胞所致鲁米诺 发光用于评价儿童免疫机能及其注射疫苗后的变化 。Pasini