甘蓝类蔬菜硫代葡萄糖甙的HPLC分析.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 P．B123 甘蓝类蔬菜硫代葡萄糖甙的HPLC分析 何洪巨，宋曙辉，唐晓伟，王文琪 (国家蔬菜工程技术研究中心，北京100097) 降解产物与植物的抗癌、风味、抗病、抗虫等功能特征有关。经常食用十字花科蔬菜会降低癌症的 发病率。由于某些GS的降解产物如吲哚．3．甲醇、吲哚．3．乙酰腈可以作为致癌物的阻断剂诱导体内 的降解产物，是迄今为止发现的最强烈的PhaseII酶诱导剂。本文应用HPLC对甘蓝类蔬菜芥蓝、 笋菜花、青花菜硫甙的种类和含量进行分析。 关键词：甘蓝类蔬菜，硫代葡萄糖甙，．HPLC 1 实验部分 1．1仪器与试剂 Waters公司高效液相色谱仪：Waters510型高压泵(HPLC Detector)，Waters717 阵列检测器(Dual九Absorbance plus自动进样器(Auto 色谱工作站组成。分析纯醋酸、醋酸钠购于北京化学试剂公司，Sulfatase(硫酸酯酶)、色谱纯乙腈、 分析纯醋酸钡、醋酸铵购于北京迪马公司，色谱纯甲醇购于北京精益化学品公司，金莲葡萄糖甙 (Glucotropaeolin，TRO)购于波兰。 1．2样品处理 倒入15mL塑料管中，放在冰盆中。沉淀物继续用70％的甲醇提取两次，同上述处理，合并上清液， 即为样品液。取一次性注射器，加入玻璃棉，塞紧，放在试管上。加入DEAE胶溶液2mL，用2mL 体滴下，将注射器转移到另一试管上，并加入759L硫酸酯酶溶液，封口过夜。将过夜的注射器，用 双蒸水洗涤3次，每次0．5mL。用注射头挤压注射器，使液体尽可能转移到试管中。将试管中液体 通过0．459m的滤膜转移Nd,玻璃瓶中，冷冻保存，待HPLC分析。 1．3分析条件 HPLC分析条件：Nova-PakR (TMACl)溶于1．6L双蒸水中，加入400mL色谱纯乙腈。 表I：脱硫硫甙的HPLC梯度洗脱条件 时间(min) 流 量 泵A(％) 泵B(％) 形状 (mL／min) 708 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 2结果与讨论 2．1甘蓝类蔬菜硫甙的HPLC图谱 图1笋菜花硫甙的HPLC图谱 图2芥蓝硫甙的HPLC图谱 2．2甘蓝类蔬菜硫甙的含量 表2甘蓝类蔬菜中硫甙的组成与含量(pmol／gDW) 菜最低(1．48I．tmol／gDW)。实验中三种蔬菜中硫甙的总量低于前人的实验的结果，可能是由于品种 不同或者地理形态差异所致。笋菜花和青花菜中含有IBE，笋菜花中PRO和SIN以及青花菜中的 40H由于含量过低而未检出。芥蓝中PRO含量最高，占其硫苷总含量的52．6％；青花菜中主要含 GBC、4ME和NEO，且相对含量都偏低；笋菜花中GBC含量最高，占其硫苷总含量的28．9％。 参考文献 【1】何洪巨，宋曙辉，王文琪，武兴德。现代仪器，2002(5)：10--15 R．andM．Dekker．Journal andFood 18-7323 Chemistry，2004(52)，73 【2】Verkerk ofAgricultural Dekker and TrendsinFood 8l 【3】3 M．，R．VerkerkW．M．F．Jongen Science，200001)，174·1 I．T．JournaloftheScienceofFoodand ILF．；DekkerM．；VerkerkR；RabotS．；Johnson Agriculture，2000(80)， 【4】Mithen 967．984