薯蓣皂甙元丁二酸单酯的合成.pdfVIP

M041 薯蓣皂甙元丁二酸单酯的合成 杨红艳 袁丽红 吴红利 欧阳平凯 （南京工业大学制药与生命科学学院，江苏 南京 210009） 摘 要 以吡啶作溶剂，DMAP作催化剂，将薯蓣皂甙元与丁二酸酐反应，生成丁二酸单酯， 收率71.6%，以TLC检测反应终点。本文通过MS、IR及 1H-NMR对产物结构进行了鉴定。 关键词 DMAP 薯蓣皂甙元 丁二酸酐 丁二酸单酯 TLC 薯蓣皂甙元是合成多种甾体激素类药物和甾体口服避孕药比较理想的前体，工业中薯蓣 皂甙元一般都是由薯蓣植物根茎中提取，随着薯蓣皂甙元工业的不断发展，薯蓣资源消耗很 大，有的品种已濒临枯竭。通过细胞培养的方式来获得薯蓣皂甙元是缓解薯蓣资源匮乏的重 要途径。 为了检测薯蓣细胞中微量薯蓣皂甙元的含量，以筛选高产细胞株，拟建立薯蓣皂甙元的 ELISA 定量分析方法。与经典化学分析方法和其它仪器测试手段相比，该方法更加灵敏高效、 消耗细胞量少。由于薯蓣皂甙元分子量低，本身不具有抗原性，必须和大分子结合才能形成 抗原。本文主要研究以吡啶为溶剂，在 DMAP 催化下将薯蓣皂甙元与丁二酸酐反应，生成丁 二酸单酯，从而在其 3位上引入一个带有羧基的基团，可以进一步和蛋白结合形成抗原，为 ELISA 定量分析方法的建立解决了一个关键问题。 用薄层法监控反应，直到甙元斑点消失。产物经 MS、IR、及 1H-NMR 分析，结构得到确认。 本文合成的薯蓣皂甙元丁二酸单酯光谱图尚未见文献报道。薯蓣皂甙元及其丁二酸单酯结构 式如下： 21 O 26 25 20 18 2223 24 27 11 12 17 O 19 13 16 1 2 9 14 15 10 8 3 RO 5 7 4 6 薯蓣皂甙元：R=H 薯蓣皂甙元丁二酸单酯：R=-COCH CH COOH 2 2 图 1 薯蓣皂甙元及其丁二酸单酯的结构式 1 实验材料 磁力搅拌器，真空泵，旋转蒸发仪，显微熔点测定仪（温度计未校正），Agilent 1100LC/ MSD 质谱仪，Nicolet 360FT-IR 仪，Bruker AV500NMR 仪，硅胶GF254，薯蓣皂甙元（昆明 同持药业公司），DMAP（苏州畅通化学品有限公司），其它试剂均为分析纯。 2 实验方法 2.1 薯蓣皂甙元丁二酸单酯的制备 将 0.2g 薯蓣皂甙元，0.2g 丁二酸酐，0.017gDMAP 加入 50ml 圆底烧瓶中，加入 20ml 无水吡啶。置于磁力搅拌器上，于 75℃下搅拌反应，随着反应进行，反应液由无色变成深 棕色。用 TLC 跟踪反应，直到薯蓣皂甙元斑点消反应结束后，产物的分离与纯化可采用两种 方法：（1）在 80℃下将吡啶减压蒸干，用蒸馏水将烧瓶中剩余物充分溶解，减压过滤，滤 渣用蒸馏水充分洗涤，再用无水乙醇重结晶, 收率 71.6%。（2）参照文献[3]，将反应液冷 却至室温，置于冰浴，用贮藏于冰箱的 33%硫酸溶液调 pH 至 5～6，析出片状固体，减压过 滤，并用蒸馏水洗涤至吡啶气味消失。