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．莨菪素抑制酪胺酸酶功效之研究． 170 ＊通訊作者 莨菪素抑制酪胺酸酶功效之研究 周玉青1 黃蕙君2 張聰民1＊ 1弘光科技大學化妝品科技研究所 2中國醫藥大學醫學檢驗生物技術學系 收到日期：98.2.13　 修訂日期：98.3.30　 接受日期：98.4.1 摘要 莨菪素(Scopoletin；6-methoxy-7-hydroxycoumarin)廣泛存在於植物中，可從芸香科白鮮屬、芸 香科九里香屬等植物中萃取，為香豆素(coumarin)化合物之一。根據過去研究，莨菪素作用於家兔 具有抗凝血的功效，此外，還具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤等多項藥理活性。本研究初步先測試不同 濃度莨菪素是否能抑制蕈菇酪胺酸酶活性，並將莨菪素與麴酸(Kojic acid)、酪胺酸酶一起反應，觀 察酵素活性之變化情形。接著使用老鼠B16-F10黑色素瘤細胞來探討莨菪素對細胞內黑色素含量以 及酪胺酸酶活性的影響。研究結果顯示，高濃度莨菪素(2 mM~10 mM)可以抑制蕈菇酪胺酸酶的活 性，隨著濃度愈高，抑制效果愈佳。但與麴酸一起反應後的酵素抑制效果，與單獨使用莨菪素或 麴酸比較，並沒有明顯的協同作用。而使用低濃度莨菪素(25 μM、50 μM、100 μM)能抑制細胞 中酪胺酸酶活性，並且使B16-F10細胞內黑色素含量減少。未來將進一步探討莨菪素可能的美白機 轉，並評估將莨菪素應用於美白保養品配方的可能性。 關鍵詞：莨菪素、酪胺酸酶、黑色素、美白 ．弘光學報56期． 171 壹、前言 近年來皮膚美白產品一直為保養品研發 的主軸之一，而影響美白最主要的因素為黑色 素(Melanin)的生成。黑色素由皮膚的黑色素細 胞(Melanocyte)負責製造，而黑色素細胞位於皮 膚表皮的基底層(Basal layer)。通常皮膚受紫外 線照射時，會刺激表皮角質細胞(Keratinocytes) 釋放內皮細胞素-1(Endothelin-1；ET-1)，進 而與黑色素細胞之細胞膜上的接受體 (ET-1 receptors )結合，訊息傳遞至黑色素細胞內 活化黑囊體 ( m e l a n o s o m e s ) 膜上的酪胺酸 酶(tyrosinase)，催化黑色素的產生，接著黑色 素會經由細胞代謝由基底層逐漸移至表皮層， 正常生理情況製造的黑色素會隨著皮膚的代 謝而分解，不會影響膚色(Takayuki Hanamura, 2008；Valentina Robila, 2008)。但如果在短時 間內曝曬紫外光，過量的黑色素無法藉由皮膚 代謝排出表層，就會沈澱於表皮層內；如果 黑色素均勻沈澱，膚色就單純變深褐色或黑 色，但如果為局部沈澱即會產生斑點，例如 雀斑、黑斑(Yoshinori Miyamura, 2006；S. H. Lim, 2008)。雀斑屬於單純性褐色或淡黑色的 斑點，主要分佈於臉部為主，尤其是雙側臉頰 與眼睛下方，且呈現對稱性，通常於雙側臉頰 的中央部位較密集，女性發生率較高，因個人 體質而異。黑斑可分為存在於表皮層（雀斑、 曬斑）以及存在於真皮層（顴骨斑、痣），減 少黑斑的形成可藉由抑制酪胺酸酶達到減少黑 色素合成的作用，以及淡化黑色素或是直接破 壞黑色素細胞。然而另一方面，黑色素的生成 對肌膚而言是具有自我保護作用，當皮膚受到 紫外線A波(Ultraviolet A；UVA；320-400 nm) 以及紫外線B波(Ultraviolet B；UVB；280-320 nm)刺激時，皮膚就會產生黑色素來避免進一 步的光照傷害，其中UVA可穿透表皮刺激真皮 層，而UVB主要作用於表皮的基底層，但過度 曝曬於紫外線中可能會使細胞產生病變，甚至 導致黑色素腫瘤的發生。除了紫外線的刺激會 引起黑色素的產生，像是內在因素（先天性遺 傳、壓力、飲食、疾病、藥物、內分泌失調、 生活習慣）以及其它外在因素（使用不適當的 化妝品）皆可能會活化酪胺酸酶，進而使黑色 素在皮膚產生色素沈澱的現象。因此在皮膚美 白的過程中，必須同時進行防曬的工作，美白 方面主要是將生成的黑色素慢慢淡化，而防曬 主要是協助皮膚避免新的黑色素產生。此外， 改善飲食習慣、適當的飲水以及多吃蔬果類食 物，對於保護、美白皮膚都具有協助的作用。 在過去研究中已被證實且被允許可以應用於化 妝品配方中的美白成份有維生素C磷酸鎂複合 物(Magnesium ascorbyl Phosphate)、麴酸(Kojic acid)、維生素C醣苷(Ascorbyl glucoside)及熊 果素(Arbutin) (Shou-Chieh Huang, 2004)。根據 衛生署89年公告，可使用於含藥化妝品之美 白成份中維生素C磷酸鎂複合物的使用限量為 3%，麴酸為2%，維生素C醣苷為2%以及