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第六章实验设计讲述
第五章 实验设计 第一节 实验设计的基本原则和步骤 广义的试验设计是指整个研究课题的设计,包括试验方案的拟订,试验单位的选择、分组的排列,试验过程中生物性状和试验指标的观察记载,试验资料的整理、分析等内容;而狭义的试验设计则仅是指试验单位的选择、分组与排列方法。 合理的试验设计对科学试验是非常重要的,它不仅能够节省人力、物力、财力和时间,更重要的是它能够减少试验误差,提高试验的精确度,取得真实可靠的试验资料,为统计分析得出正确的判断和结论打下基础。 一、实验设计的基本原则 实验设计是一门独立的学科,但与生物统计学有密切的联系。我们在前面讲t检验时,讲到过成组数据t检验和配对数据t检验。实际上,这就是两种最简单的实验设计,一种叫成组比较设计,一种叫配对比较设计。在方差分析一章中涉及的实验设计问题就更多了。如两因素交叉分组实验的方差分析,对实验的设计是有一定的要求的,只有正确地设计实验,方差分析结果才可靠。否则,虽然花费了大量的费用,占用了宝贵的时间,得到的结果却很难说明任何问题。因此,学习过生物统计学,但缺少实验设计知识,生物统计学也不能充分发挥它的作用。 一个良好的实验设计,可以用最少的实验次数,得到足够的实验数据。为了能够用严格的统计学方法,计算和分析实验结果,在实验之前就应当根据统计学的要求制定出一套完整的实验方案,实验过程就是方案的实施过程。必要的数据决不可丢失,不必要的数据大胆舍弃。合理的实验设计,可取得事半功倍的效果。有些研究者不甚注意实验设计和统计学的密切结合,或者是缺乏生物统计学或实验设计中的某一方面知识,在实验中收集了大量的数据,不管有用没用,胡子眉毛一把抓,却单单把关键的问题忽略了。其结果,有用的数据不多,事倍功半。例如,在设计一个实验时,忽略了实验材料的同质性,加大了实验误差,处理间本来存在的差异却检验不出来,从而得出错误的结论。 实验设计和实验结果分析,都是为实验服务的,为了得到正确的结果,实验者必须要有实事求是的科学精神,认真负责的科学态度。实验开始之前要做周密的设计,随时发现问题随时纠正,一丝马虎不得。一旦发现比较严重的错误时,甚至整个实验都需要推倒重来,决不能图一时省事,迁就遮掩,自欺欺人。科学的结论是不以人的意志为转移的,到头来只能是自食其果。 实验设计的两个基本原则 重复(replication)和随机化(randomization)。所谓重复就是将一基本实验重做一次或几次。例如,测定不同年龄组正常人血红蛋白含量实验,在每一年龄组内测一人,即为一基本实验。若将这一基本实验重做5次,即每一年龄组,抽取5人测血红蛋白含量,则称该实验有5次重复。 例如,我们想分析大豆籽粒中VD的含量。这一基本实验包括以下过程:随机选取若干大豆,磨成豆粉,取一定数量的豆粉,乙醇回流抽提脂肪,提取液皂化,萃取,层析分离、纯化,在265 um下测吸光度,最后计算出VD的含量。 重复实验必须是上述过程的完整重复。如果用同一份纯化液重测定吸光度,所得到的若干数据,表面上看起来也是一种重复,但这不是重复实验,仅仅是重复测量。用重复测量所估计的误差只是测量过程中的误差,不是实验误差。不仅在实验过程的最后一步重复测量不属于重复实验,就是在整个实验过程中的任何一步之后重复测量,都不属于重复实验。上例的重复实验包括从大豆的取样直到计算出VD含量的整个过程。 设置重复有两个重要意义。①只有设置重复才能得到实验误差的估计。根据标准误差的定义 Sx=S/n1/2,为了得到标准误差,首先必须计算出标准差S,标准差是通过重复得到的。实验不设置重复,便无法得到标准差,也就得不到标准误差。②只有设置重复才能推断出处理效应。 例如,比较两种不同药物的疗效,每一种药物只由一人服用,服用 A药物的人 10 d痊愈,服用 B药物的人12 d痊愈。仅仅根据以上结果,无法判断两种药物的疗效是否有显著不同。 因此,必须随机抽取若干名病人服用A药物,若干名病人服用B药物,分别计算出服用两种药物病人痊愈天数的标准误差,再用两种药物平均痊愈天数之差与标准误差比较,如果两者之间的差异不能用偶然性来解释,才能证明药效之间存在差异(成组数据t检验)。 从以上所述可见,设置重复是实验设计的最基本原则,没有重复的实验设计是彻底失败的设计,对这样的数据无法做任何统计处理,也不能得出任何令人信服的结论。 实验设计的第二个原则是随机化。随机化是指实验材料的配置和实验处理的顺序都是随机确定的。 统计学理论是建立在独立随机变量基础之上的,它的研究对象必须是随机变量。因此在做统计推断时,所获得的样本必须是随机样本,不然的话,便不能用前面所讲的统计方法做推断。只有通过随机化才能使这一条件得到满足,才能使用统计学方法对实验结果做分析和处理。另外,从直观上,我们也可以看出
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