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尾巨桉胚状体诱导及愈伤组织差异研究.pdf
西北植物学报，20 14 ， 34(7);1345 -- 1351
Acta Bot . Boreal. -Occidellt. Sill.
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文章编号 ; 1000-4025(2014) 07-1345-07 doi; 10. 7606/j. issn. 1000-4025 . 2014. 07. 1345
尾巨按胚状体诱导及愈伤组织差异研究
欧阳乐军，沙月娥，黄真池，曾富华 祷
(湛江师范学院，广东湛江 524048)
摘 要:以尾巨校优良元性系无茵茵茎段为外槌休，通过对多种不同浓度生长调节 ~J组合的优化，进行胚状体诱导
研究;并对胚性与非胚性愈伤组织进行形态解剖学观察、相关生理指标检测以及相关基因荧光定:在 PCR 分析，以
揭示尾巨按胚性愈伤组织非胚性化发生的机理，为建立尾巨校体细胞胚胎再生体系提供参考。 结架表明 ; (1)胚性
愈伤组织在 MS+O. l mg/ L NAA+ O. 01 mg/ L TDZ 培养基中诱导得到胚状体，外植体经过 0. 5 mol/L 族精处理
12 h 有助于胚性愈伤组织产生胚状体，胚状体圾商发生率为 16. 7 %. (2)尾巨校胚性与非胚性愈伤组织石蜡切片
观察发现，两者的细胞形态特征存在明显的差异，胚险愈伤组织细胞体积小，排列紧密，表现出典型的胚性细胞特
征，而非胚性细胞比较大，排列疏松，细胞量不规则形状 。 (3) 生 2型生化指标检测结果表明，司l?胚性愈伤组织中蛋白
质含量、SOD、PPO 及 CAT 活性均显著低于~E性愈伤组织，非胚性愈伤组织中木质索、可溶性糖含量以及 PA上，和
POD 活性要高于胚性愈伤组织，二者的反 l均桂酸 4-单力日筑酶基因、淀粉磷酸化酶基因、谷脱甘Jjf(硫转移酶基因、葡
萄糖-1-磷酸服背酸转移酶基因、葡萄糖六磷酸异构酶基因、分支酸合酶基因以及苯丙氨酸;解氮弱基因表达差异也
达到显著水平 。
关键词:尾巨校;胚状体诱导;分化机理
中图分类号: Q813. 1; Q942. 6; Q944. 5 文献标志码 :A
Somatic Embryogenesis Induction and the Difference of
Callus of Eucalyptus urophylla XEucalyptus grαndis
OUYANG Lejun , SHA Yuee , H UANG 21enchi , ZENG Fuhua .
(Zhanjiang Norrnal University , Zhanjiang , Guangdong 524048 , China)
Abstract : 1n this study , t he somatic embryogenesis induction and s hoot regeneration were st udied systemati-
cally in elite clone of Eucaly户tus ur.。ρhyUa X E. grandis by comparing the variety of combinations of dif-
ferent growth regulators. Embryogenic callus and non-embryonic ca llus of E. uroρhylla X E. grαndis were
used as explants to study t he changes of different k inds of callus ,and tbe mechanism of embryogenic callus
of E. urophylla X E. grandis was revealed t hrough ana lyzing h istocytological changes, detecting physiologi-
cal , biochemical indices and fluorescence quantitative PCR. T his work laid t he fOllndations for p lant regen-
eration of E . uroρhylla X E. grandis t h rougb somatic embryogenesis . (1) Somatic embryogenesis was ob伽
served in call 1ls in the presence of MS+O. 1 mg/ L NAA + 0. 01 mg/ L TDZ. T he best somatic emb
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