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4 发酵工程 学习目的 掌握发酵工程的基本类型和基本原理,了解典型发酵产品的生产工艺,认识发酵的基本过程及常用的发酵设备。 发酵工程是一门将微生物学、生物化学和化学工程学的基本原理有机地结合起来,利用微生物的生长和代谢活动来生产各种有用物质的工程技术。 它以培养微生物为主,所以又称微生物工程。 发酵的定义 发酵(fermentation)最初来自拉丁语“发泡”(fervere),是指酵母作用于果汁或发芽谷物产生CO2的现象。 生物化学上将发酵定义为“微生物在无氧时的代谢过程”。 目前,人们把利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体或其代谢产物的过程统称为发酵。 微生物菌体发酵 微生物酶发酵 微生物代谢产物发酵 微生物的转化发酵 生物工程细胞的发酵 微生物代谢产物 在菌体对数生长期所产生的产物,如氨基酸、核苷酸、蛋白质、核酸、糖类等,是菌体生长繁殖所必需的,这些产物叫做初级代谢产物。 在菌体生长静止期,某些菌体能合成一些具有特定功能的产物,如抗生素、生物碱、细菌毒素、植物生长因子等。这些产物与菌体生长繁殖无明显关系,叫做次级代谢产物。 微生物代谢产物类型 4.1.2 发酵技术的特点 发酵过程以生命体的自动调节方式进行,数十个反应过程能够在发酵设备中一次完成。 反应通常在常温常压下进行,条件温和,能耗少,设备较简单。 原料通常以糖蜜、淀粉等碳水化合物为主,可以是农副产品、工业废水或可再生资源(如植物秸秆、木屑等),微生物本身能有选择地摄取所需物质。 容易生产复杂的高分子化合物,能高度选择地在复杂化合物的特定部位进行氧化、还原、官能团引入或去除等反应。 发酵过程中需要防止杂菌污染,大多情况下设备需要进行严格的冲洗、灭菌,空气需要过滤等。 4.1.3 发酵技术的应用 食品工业 能源工业 化学工业 利用微生物合成生物降解材料 ----聚羟基脂肪酸脂 (Polyhydroxyalkanoate?PHA) 众所周知,微生物的营养因素包括:碳源、氮源、无机盐、微量元素、水和生长因子(氨基酸、维生素和嘌呤或嘧啶)?当 环境中,缺少氮源而碳源浓度又比较高时、一部分微生物体内就积累一些颗粒、被分离纯化后即为具有热塑性的生物降解高分子材料。现已知有300余种细菌可以积累单体在90种以上的 PHA? 冶金工业 农业 环境保护 4.2 微生物发酵过程 微生物发酵过程即微生物反应过程,是指由微生物在生长繁殖过程中所引起的生化反应的过程。 好氧性发酵 在发酵过程中需要不断地通入一定量的无菌空气。 如利用黑曲霉进行的柠檬酸发酵,利用棒状杆菌进行的谷氨酸发酵,利用黄单孢菌进行的多糖发酵等。 厌氧性发酵 在发酵时不需要供给空气。 如乳酸杆菌引起的乳酸发酵,梭状芽孢杆菌引起的丙酮、丁醇发酵等。 4.2.1 发酵工业中的常用微生物 细菌 放线菌 酵母菌 霉菌 其他微生物 4.2.2 培养基 培养基是人们提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物需要的多种营养物质的混合物。 孢子培养基 种子培养基 发酵培养基 4.2.2.2 发酵培养基的组成 4.3.1.1 分批发酵 营养物和菌种一次加入进行培养,直到结束放罐,中间除了空气进入和尾气排出,与外部没有物料交换。 传统的生物产品发酵多用此过程。 根据不同发酵类型,每批发酵需要十几个小时到几周时间。 全过程包括空罐灭菌、加入灭过菌的培养基、接种、发酵过程、放罐和洗罐,所需时间的总和为一个发酵周期。 典型的分批发酵工艺流程图 微生物分批培养的生长曲线 4.3.1.2 连续发酵 以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基,同时以相同的速度流出培养液,从而使发酵罐内的液量维持恒定,微生物在稳定状态下生长。 4.3.1.3 补料分批发酵 又称半连续发酵,是介于分批发酵和连续发酵之间的一种发酵技术,是指在微生物分批发酵中,以某种方式向培养系统补加一定物料的培养技术。 4.3.2 发酵工艺控制 pH值对微生物的生长繁殖和产物合成的影响有以下几个方面:①影响酶的活性,当pH值抑制菌体中某些酶的活性时,会阻碍菌体的新陈代谢;②影响微生物细胞膜所带电荷的状态,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收及代谢产物的排泄;③影响培养基中某些组分和中间代谢产物的解离,从而影响微生物对这些物质的利用;④pH值不同,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。另外,pH值还会影响某些霉菌的形态。 对于好氧发酵,溶解氧浓度是最重要的参数之一。好氧性微生物在进行深层培养时,需要适量的溶解氧以维持其呼吸代谢和某些产物的合成,氧的不足会造成代谢异
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