细菌学教学课件 第十二章 细菌与免疫疫苗课件.pptVIP

目的基因（含载体质粒）含有CpG基序的回文序列，能激活较强的CTL效应，并能激活巨噬细胞与NK细胞，因此，CpG回文序列被称为免疫刺激DNA序列。 CpG基序与IL-2、TNF-β、IFN-γ的基因结构相似而产生协同作用。 六、核酸疫苗 ①目的基因的选择：侧重于免疫原性，即所表达的目的蛋白刺激机体免疫应答的能力。目的蛋白中是否具有受MHC分子限制的T细胞抗原表位，是保证核酸免疫有效的先决条件。 核酸疫苗所选择的目的基因应尽量避免有害基因成分，特别是病毒或肿瘤的核酸免疫。 ②载体的选择：构建DNA疫苗的质粒通常是非复制型的真核表达质粒，能高水平地表达目的基因。 重组质粒可分为两个部分： ● 转录部分：由启动子、插入的目的抗原cDNA和poly A终止子组成，指导目的蛋白在体内表达，诱发特异性免疫应答。 ● 佐剂部分：CpG基序。 2、构建与免疫 ③启动子的选择：质粒在宿主细胞内表达外源性蛋白的水平与调控DNA表达的启动子关系密切。表达水平的不同又直接影响免疫应答的强度和持续性。 ④DNA疫苗的优化 ● 联合构建：在载体质粒中插入2个或2个以上目的抗原基因，既能激活CD8＋T细胞产生特异性CTL，又能激活CD4＋Th2细胞产生体液免疫。  ● 协同构建：将目的基因与某种细胞因子的基因构建成嵌合基因，以促进目的基因的免疫效果。 ⑤免疫途径、剂量、时间：常见免疫途径有肌肉注射、皮内或皮下免疫、粘膜免疫等。 3、核酸疫苗与传统疫苗的比较 传统免疫所使用的抗原一般是灭活病原体、减毒的活病原体或病原体的亚单位蛋白。 核酸疫苗仅仅是病原体某种抗原的基因片段，可提供与天然构象极为接近的目的蛋白，提呈给宿主免疫系统，与自然感染过程相似。 核酸疫苗兼有重组亚单位疫苗的安全性和减毒活疫苗诱导全方位免疫应答的高效力。 灭活疫苗和亚单位疫苗在体内代谢较快，难以长时间维持较稳定的含量，需多次接种免疫原，加强免疫。 核酸疫苗可在体内不断翻译表达，较长时间维持较高的蛋白水平，免疫具有连续性，一次接种可获得长期或终身免疫力。 采用不同毒株之间的保守DNA序列作核酸疫苗，可使其免疫作用突破地理株的限制，从而有效地预防病原体极易发生变异的某些疾病（如丙型肝炎、甲型流感、艾滋病等）。 核酸疫苗与世界卫生组织儿童计划免疫长远目标（用一种疫苗预防多种疾病）相吻合，不仅能预防疾病，还可作为治疗性疫苗，治疗一些复杂难治的疾病，如病毒性肝炎、癌症等。 六、核酸疫苗 预防性疫苗的接种对象是健康人群，多采用模拟自然感染过程的策略，一般为微生物的保护性抗原，成分较单纯，主要用于免疫预防作用，对机体无明显的病理损伤，使用安全可靠。 已广泛用于预防病原体进化相对保守、自然感染可获得牢固免疫力、保护性免疫主要依赖于中和抗体的传染病，如天花、脊髓灰质炎、麻疹乙型肝炎、白喉、破伤风等。 七、治疗性疫苗 治疗性疫苗（therapeutic vaccine）的接种对象是持续性感染患者，其抗原成分不像预防性疫苗那样单纯，可根据需要进行组合和调整，例如，将微生物抗原（基因）与不同细胞因子（基因）构建成嵌合性疫苗。 治疗性疫苗旨在启动Th1极化和有效的细胞免疫，打破机体的免疫耐受状态，部分纠正机体的免疫缺陷，提高对病原体特异性免疫应答水平，故特别强调佐剂的选用。 七、治疗性疫苗 由于目前很多传染病、肿瘤等尚无有效的治疗药物，而治疗性疫苗的不良反应比化疗药物少，故治疗性疫苗与药物治疗可协同作用，提高机体的特异性免疫应答水平，加速康复，减少复发。 七、治疗性疫苗 谢 谢！ 抗胞内寄生菌的三步骤 早期 中期 晚期 IFN-gamma T杀伤细胞对感染靶细胞 作用机制 抗胞内寄生菌的天然免疫和获得性免疫 活 菌 数 感染清除 感染控制 活菌数 活菌数 感染后天数 细胞因子的抗细菌感染作用 细胞因子 抗菌免疫的作用 产生的细胞 在看细菌感染中的作用 Chemokines Likely Epithelial cell, endothelial cell, macrophage Leukocyte recruitment and activation IL-1 Important role proven Macrophage Leukocyte recruitment and stimulation IL-6 Essential role proven Macrophage, T cel