第四版2015F骨髓室SOP文件.docVIP

PAGE  PAGE 20 标准操作规程文件号：SLYYJY-F-1 版本：第四版 页码： 1 总页数：20项目骨髓细胞学检验编写人侯 淼编写时间2015年7月20日医务科保管者吴雅静审核人侯 淼审核时间2015年8月11日院办保管者李媛媛批准人刘晓良批准时间2015年8月19日院档案室保管者李媛媛检验科主任刘晓良临床骨髓检验室侯 淼实施时间： 2015年8月19日 本规程每两年内部审核一次骨髓细胞学检查 骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片。采用骨髓小粒丰富、制片厚薄均匀的涂片，经瑞姬氏染液染色后，于显微镜下检查细胞质和量的变化。F1.1 试剂 1. 瑞姬氏染色液： 2. 磷酸盐缓冲液： 磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钠1.0g、加蒸馏水到5000ml。最后纠正pH6.5。 F1.2 操作 1. 骨髓取材： 取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等。两岁以内小孩最好用胫骨，成人常取髂后上棘，此部位穿刺方便，病人也易接受．穿刺前要求严格消毒，杜绝细菌感染，除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外，还应注意穿刺包和手套消毒时间有否过期。戴手套要熟练，避免手套接触未消毒物品。穿刺针进入髓腔时常有脱空感，吸取前针筒内应留有1m1左右的空隙，否则髓液很快进入针筒空隙而无法取出。针筒内若有水份也要用消毒纱布擦干，以免溶解细胞。吸液量一般控制在0.2m1左右。因吸量过多，易被外周血稀释。部分病人干抽或吸出量太少时，不要将针头立即拔出，可边抽边调节针头深浅，或边抽边缓慢外移针头，最后将针头内可能残留的髓液尽量推出、制片，以减少病人痛苦。 2. 涂片 骨髓涂片的制作方法与血片制作方法基本相同,但因有骨髓小粒和脂肪滴,有核细胞较多,因此较血液粘稠,推片略难于血片,推片时角度要小一些,速度要慢一些,避免骨髓片过厚。 3. 染色 选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片，自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记。加瑞姬氏染色液8-12滴，用吸球吹吸并使其布满整张涂片，约半分钟后，加磷酸盐缓冲液5-10滴，再用吸球吹吸气，使两液充分混匀，若有金黄色油膜出现，染色效果更佳。染色时间一般为10-20分钟，夏天可缩短些、冬天则可延长些。冲洗时应乎放玻片让流水缓慢冲洗。另外，因手拿玻片处可能会有染料残留，应更换手拿位置再予冲洗。染好的涂片要自然干燥，切忌加热烘干，否则细胞退色而影响观察。 F1.3 分析要点 1. 骨髓片观察的内容: (1)肉眼观察涂片有无骨髓小粒、脂肪滴制片、染色是否良好。 (2)低倍镜下观察骨髓增生情况(主要分为5级)，标本有否稀释，并计数全片的巨核细胞，了解有无特殊异常细胞。 (3)高倍镜下观察巨核细胞形态及巨核细胞分类计数(一般被分类的巨核细胞应不少于25个)，并进一步观察低倍镜下看到的可疑细胞。 (4)油镜下明确在低、高倍镜发现的异常或可疑细胞的性质，并作骨髓细胞分类和全面的细胞形态分析。 骨髓细胞分类计数的正常范围较难制定。因为分析骨髓象是以骨髓细胞变化为基础，并结合临床表现和血象的综合性分析，不能只以单一的比例作为是否正常的标准。另外，个体差异、穿刺是否成功和分类部位等，都会影响细胞分类的结果。 2. 正常骨髓主要指标及其分类原则： (1) 正常骨髓象主要指标： ①骨髓增生程度呈增生活跃。②有核细胞量中等，小粒内细胞较丰富。③涂片无脂肪滴，或在中老年者见少量脂肪滴。④粒、红细胞比例约2-4:1，粒细胞可占50％，淋巴细胞约占20％(小儿可高达40％)，单核细胞、浆细胞、网状细胞一般＜3％。⑤巨核细胞在1.5cm×3cm涂片上可找到20-100个。若小于20个，排除因标本稀释原因外，可结合临床考虑巨核细胞减少。产血小板巨核细胞应不少于总巨核细胞的1／3，成簇血小板易见到。⑥嗜酸性粒细胞小于5％。嗜碱性粒细胞＜1％。⑦原始细胞中，原粒细胞和原红细胞均小于2％。⑧偶尔可见内皮细胞、组织嗜碱细胞、组织嗜酸细胞、成骨细胞、破骨细胞和脂肪细胞等。(2) 观察骨照片应注意的事项：①对介于上、下两阶段的同一系细胞，应按划下不划上的原则分类。对分类曲线出现不明原因的畸形分布时，介于上、下阶段的细胞可适当调整其阶段性；②一般病人的骨髓片中，偶见或为疑似的原始单核细胞、原始淋巴细胞(小儿除外)及原始浆细胞，可不作报告或归于原始粒细胞中，以减少分类出现的混乱。③骨髓细胞分类计数不应少于200个，否则分类误差太大，较难反映细胞的真实分布情况。④书写报告时要对粒、红、巨三系细胞比例、形态变化分别描写，有特殊变化的情况，尤其对临床诊治有价