油茶叶片脱分化后的再分化技术研究.pdfVIP

６５０ ＣＲＯＰＲＥＳＥＡＲＣＨ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０１４，２８（６） 油茶叶片脱分化后的再分化技术研究 蔡　冬　元 （湖南生物机电职业技术学院，长沙 ４１０１２７） 摘　要：在选定 ＭＳ基本培养基的基础上，通过改变 ＮＡＡ与 ＢＡ两种植物生长调节剂的浓度与添加量，展开了针对 “湘林 １号”油茶叶片脱分化后得到的愈伤组织或胚状体细胞进行的植株形态再分化试验。试验结果表明：将呈 白色、黄白色或浅黄绿色、凹凸不平、质地疏松的愈伤组织块接种在 ＭＳ＋ＮＡＡ（０３ｍｇ／Ｌ）＋ＢＡ（２０ｍｇ／Ｌ）＋蔗 糖（３０ｇ／Ｌ）＋琼脂（７ｇ／Ｌ）培养基中 ３０ｄ后，在白色突起部位分化出了丛生芽且生长良好。利用油茶的再生芽接 种时，其增殖系数为 ６５０。 关键词：油茶；组织培养；繁殖；脱分化；再分化 中图分类号：Ｓ７９４４；Ｑ９４３１　　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１００１５２８０（２０１４）０６０６５００３　　　　ＤＯＩ：１０３９６９／ｊｉｓｓｎ１００１５２８０２０１４０６１８ 　　油茶（Ｃａｍｅｌｌｉａｏｌｅｉｆｅｒａ）是我国南方特有的重要 １２　试验方法 木本食用油料树种，用途广泛，具有重要的开发利用 １２１　形态再分化与增殖培养基的制作 价值［１，２］。优质高产的油茶种苗生产已成为油茶产 业发展的重中之重。而传统的扦插、嫁接等无性繁 为筛选出适合油茶叶片脱分化后形成的愈伤组 殖种苗的方法已难于满足近年来油茶生产对优良种 织进行形态器官再分化培养基，通过改变 ＮＡＡ与 苗日益增长的需求。因此，尽快建立操作性强、成本 ＢＡ的添加浓度与质量展开了双因子重复试验。试 相对较低、繁殖周期短、速度快、生命力强的油茶组 验设计见表 １。 ［２，３］ 培快繁体系，是油茶组培工厂化育苗的关键 。 表 １　不同 ＮＡＡ与 ＢＡ添加浓度的油茶叶片脱分化后愈伤 利用油茶叶片与带芽茎段等做外植体在初始诱 组织再分化双因子重复试验（ｍｇ／Ｌ） ［４～６］ 导脱分化阶段易获得愈伤组织 ，但由于油茶植 ＢＡ ＮＡＡ 株体内富含皂素［１，７］，在再分化阶段进行植株的形 ２００ １５０ １００ 态器官分化较难，不易获得再生植株［４，５，６，８，９］。本研 ０７０ Ａ Ｂ Ｃ ０５０ Ｄ Ｅ Ｆ 究在油茶叶片初始诱导脱分化而获得愈伤组织与胚 ０３０ Ｇ Ｈ Ｉ 状体细胞的基础上，进一步研究植株形态再分化技 术，为油茶组培苗的批量生产提供技术支持。 按表 １中 ９个 培 养 基 配 方，各 做 ＭＳ培 养 基