不同产地天花粉药材中瓜氨酸的含量测定.docVIP

　　不同产地天花粉药材中瓜氨酸的含量测定 作者：杨玉琴 ，张丽艳，李健，周萍 【摘要】 　　目的采用薄层色谱扫描法测定不同产地天花粉中瓜氨酸的含量，建立瓜氨酸的含量测定方法。方法展开剂:正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(9.5∶2∶3.5∶3)；显色剂：1%茚三酮试液;检测波长:λS=510 nm，λR=700 nm。结果瓜氨酸在0.200 8～2.008 μg时，与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999）；平均回收率为99.12% ，RSD =1.12%。结论该方法操作简便，快速，准确，可用于瓜氨酸的含量测定。 【关键词】 天花粉 瓜氨酸 薄层色谱扫描法 　　Abstract：ObjectiveTo develop an TLC method for the determination of trichosanthin Citrullin content from different habitats.MethodsButanol-ethanol-acetic acid-H2O (9.5∶2∶3.5∶3) obile phase, 1% ninhydrin test solution , λ R = 700 nm .ResultsThere ethod is simple,rapid and accurate.It can be used to determine the contents of Citrullin in Radix Trichosanthis.. 　　Key .或双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥根［1］，性微寒，味甘，微苦，归肺、胃经。有清热生津，消肿排脓，抗癌之功效。用于热病烦渴，肺热燥咳，内热消渴等病证。本实验采用薄层扫描法［2］对不同产地天花粉进行测定，建立瓜氨酸的含量测定方法。 　　 1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　CS-9301双波长薄层扫描仪(日本岛津)；REPROSTAR3薄层色谱数码相机系统(瑞士卡玛)；AE240 电子 天平［梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司］；超声波清洗器（北京医疗设备厂）。 　　1.2 试药 　　瓜氨酸对照品（ 中国 药品生物制品检定所，供含量测定用，批号0875-200205）；硅胶G机制板（山东青岛海洋化工厂）；正丁醇、无水乙醇、冰醋酸等试剂均为分析纯。 　　1.3 药材天花粉药材为市售（购自重庆、贵州、广西、广东等地）及采集的野生样品（采自贵州省惠水、龙里、贵阳、清镇、高坡等地），经我院付志明老师鉴定为双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥根。 　　 2 方法与结果 　　2.1 实验条件 　　2.1.1 扫描条件 　　扫描方式：双波长反射式锯齿扫描；扫描波长：λS=510 nm，λR=700 nm；狭缝宽度：0．4 mm×0．4 mm；线性参数：Sx=3。按扫描条件下操作，其薄层扫描图见图1。 　　2.1.2 色谱条件 　　展开剂：正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水(9.5∶2∶3.5∶3)；显色剂：1%茚三酮试液。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取瓜氨酸对照品适量于50 ml容量瓶中，加50%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，制成0．502 mg/ml的溶液。精密吸取上述溶液2 ml于5 ml容量瓶中，加50%乙醇溶液稀释至刻度，制成0.200 8 mg/ml，即得对照品溶液，备用。 　 　　2.3 供试品溶液的制备 　　精密称取天花粉药材粉末（过60目筛）约0.12 g，于25 ml三角烧瓶中，精密加入50%乙醇溶液10 ml，称定重量；超声提取40 min，放冷，用50%乙醇补足减失重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 　　2.4 标准曲线的制备 　　分别精密吸取对照品溶液1，2，4，6，8，10 μl分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件项下展开，显色扫描。以峰面积积分值为纵坐标，点样量为横坐标，绘制工作曲线。 计算 回归方程Y=3 581.8X-200.95，r= 0.996；瓜氨酸在0.200 8～ 2.008 μg范围内呈良好线性关系。 　　2.5 精密度实验精密吸取同一供试品溶液2 μl，点于一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，测定5次，结果表明，精密度良好，RSD=0.26%。 　　2.6 稳定性实验精密吸取同一供试液2 μl，点于一硅胶G薄层板上，按上述色谱条件展开，显色扫描。每隔0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 h测定1次，结果表明在3.0 h内稳定。 　　2.7 重复性实验 　　2.7.1 同板重复性分别精密称取同一样品5份，照“2.3”供试品溶液的制备项下制备供试液；分别精密吸取每份供试液各2 μl，点于同一硅胶G