头孢呋辛酯片微生物限度检查方法学验证的研究.pdfVIP

理论研究 啊 I 头孢呋辛酯片微生物限度检查方法学验证的研究 王冬梅 (哈药集团制药总厂 黑龙扛 哈尔滨 150086) [摘 要]目的：通过一系列验证，确认所采用方法适合于头孢呋辛酯片的微生物限度检查。方法：按品种项下微生物限度检查规定对每一试验菌逐一进行验 证。结果：头孢吠辛酯片的微生物限度检查需采用多种方法联合使用消除其抑菌性 结论：采用低速离心联合薄膜过滤法用于头孢呋辛酯片的细菌计数及控制菌检 查是可行的。 [关键词]头孢呋辛酯片，微生物限度检查； 中图分类号：TD856 文献标识码 ：A 文章编号：1009～914X(2014)10—0323—01 一 ． 验证材料 ： 3．3供试品对照组：不加菌液，其他同实验组方法，测定供试品本底菌数，每 1．供试品：头孢呋辛酯片 (0．25g)(批号为： 株试验菌平行制备2个平皿。 3．4稀释剂对照组：以pH7．O无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液替代供试液，其他 2．培养基及试液：营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、营养肉汤、乳糖胆盐培养基、 同实验组方法，每株试验菌平行制备2个平皿。 ． pH7．O氯化钠一蛋白胨缓冲液 3．5培养：细菌计数平板30-352(培养3天；霉菌、酵母菌计数平板23—28C 3．菌种 ：枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲 培养5天，逐 日点计菌数。 霉 3．62]1断标准：稀释剂对照组及试验组的菌回收率应均不低于70％。 4．仪器：电热恒温水浴锅、电动离心沉淀机、电动匀浆仪； 3．7验证结果：见表1。 =．验证步骤 ： 4控制菌检查方法的验证： 1菌液的制备：将金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌 4．1试验组：取1：l0的供试液10ml，置无菌条件离心(500转／分)3分钟，取 的新鲜培养物及黑曲霉孢子悬液用1O倍稀释法，分别制成菌数约为50-100cfu／ 上清液置无菌试管中，用PH7．呒 菌氯化钠一蛋白胨缓冲液补至原量，混匀后转 ml的菌悬液，混匀备用 。 入500mlPH7．O无菌氯化钠一蛋 白胨缓冲液 中，混匀，然后按照中国药典附录 2供试液制备：取供试品lOg置匀浆杯 中，~J[1pH7．0无菌氯化钠一蛋白胨缓 微“生物限度检查法”中薄膜过滤法进行过滤，并用PH7．0无菌氯化钠一蛋白胨 冲液至100rnl，用电动匀浆仪将供试品打碎，混匀，制成1：10的供试液 。 缓冲液冲洗滤膜，每膜500ml，并在最后100ml冲洗液中加入相应试验菌液 3细菌，霉菌及酵母菌计数方法的验证 lml，过滤后取出滤膜 ，加至100ml胆盐乳糖培养基中，置30-35℃培养18