第二部分细菌性疾病的微生物学诊断.PDFVIP

第二部分 细菌性疾病的微生物学诊断 细菌性疾病的正确诊断及合理治疗(如通过细菌的药敏试验以选择敏感药物)，常需进行 微生物学检查。微生物学检查包括细菌及其抗原的检测和抗体检测两方面。 检测细菌或其抗原是诊断细菌性疾病的重要依据，尤其是在正常情况下本应无菌的标本 中检出病原菌时，则更有诊断意义。细菌种类很多，其生物学性状各异，要鉴定某种细菌常 需采用多种方法，这些方法主要有显微镜直接检查、分离培养、生化反应试验、抗原分析及 动物实验等。细菌各论的实验，就是要观察和掌握常见细菌的生物学特性及学会从临床标本 中分离和鉴定常见细菌。 检测抗体也常可作为诊断细菌性疾病的重要辅助手段。机体感染病原菌后．经一定时间 产生抗体，抗体量随病程而增高，因此，用已知抗原测定病人体液中有无相应抗体及抗体量 的动态变化可辅助诊断疾病，此对于病程较长，抗原性较强的细菌感染尤为重要，如诊断伤 寒和副伤寒的肥达氏试验就是常用的诊断方法。 细菌培养标本的一般要求： 各种临床标本作细菌学分离鉴定时，收集、送验标本都有其特殊要求，但一般都要注意 如下几点。 1．送验标本必须用细菌检查室特备的无菌试管或其他无菌容器，标本采集后应尽速送 检(培养厌氧菌常需采用特殊的厌氧收集瓶)。 2．采集标本时应严格执行无菌操作，防止杂菌污染，送检途中严防容器翻倒或破裂， 以致标本溢出，导致污染及传播。 3．细菌培养标本不得任意加入防腐、抗菌药物或其他药品。血液、脑脊液等标本，应 在病人被使用抗菌药物治疗前采集，如已使用，在送检时应注明已使用过的抗菌药物名称， 以便在培养时作适当处理。 4．对特殊细菌的检查应加注明，如厌氧菌、结核杆菌、脑膜炎球菌、真菌等。须做药 物敏感试验者，应注明抗菌药物的名称。 实验九 血液、骨髓的细菌学检查 正常人的血流和骨髓内是无菌的。当细菌侵入血流或骨髓生长繁殖，引起寒战、高热等 症状时常可检出致病菌。常见的致病菌为金黄色葡萄菌和大肠杆菌，其他尚有绿脓杆菌、变 形杆菌、粪产碱杆菌、链球菌、沙门菌等。败血症的病原菌种类与原发病灶及细菌入侵途径 有一定关系。如疖、痈挤弄后的败血症主要为金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌。如临床表现 酷似败血症而血培养多次阴性者，应注意厌氧菌和真菌感染的可能性。 42 一、标本采取 (一)尽可能于疾病早期、高热期间、抗菌药物治疗前采血。 (二)无菌操作自静脉采血 5ml(骨髓液 1-2 m1)加于含 50ml 肉汤的培养瓶中摇匀，以防 血液凝固(培养瓶口需火焰灭菌)。血液和骨髓量相当于培养液的 l/10，因血液过多，血中 的抑菌或杀菌物未被充分稀释，会影响病原菌的生长繁殖；血液过少则含菌数也少，两者都 会影响阳性结果。 如果取血液前病人已用过四环素、链霉素或磺胺等药物治疗，则血中可能含有相当浓度 的药物，此时则需加入 0.3％硫酸镁(拮抗链霉素、四环素组、多粘菌素等的抗菌作用)、对 氨苯甲酸(5 ug/lOOml，拮抗磺胺类药物的抗菌作用)、青霉素酶(破坏青霉素分子)于培养基 中以抵消上述药物抑菌作用，提高分离的阳性率。 (三)凡疑有厌氧菌败血症时，应取厌氧血培养专用培养瓶，按分离培养厌氧菌程序进行。 二、检查程序 （图 9-1） 图 9-l 血标本细菌学鉴定流程图 【注意事项】 1．如疑有脑膜炎球菌败血症，标本应接种于先在 37 ℃预温的液体培养基中，置 10％ CO2 环境作增菌培养。每日观察，发现混浊后接种于 37 ℃预温的巧克力平板或血平板，置 同样环境培养。 2．对亚急性细菌性心内膜炎患者血培养，宜采血 l0 ml 培养，定期移种，3 周后未生 长者，可报告“无菌生长”。 3．由血液培养分离出的任何细菌均应写出报告，如认为细菌生长系污染所致，应报告： “××菌生长，可能系污染”。临床医师对报告应仔细研究，与患者病情核对，以便区别病 原菌和污染细菌。