2,4,6-三溴苯酚降解菌的筛选.pdfVIP

第38卷，第 3期 安 徽 化 工 Vo1．38，N0．3 ． Jun．2012 1l 2012年 6月 ANHUICHEMICAL INDUSTRY 2，4，6一三溴苯酚降解菌的筛选 凌 晨 ，刘 波 (1．合肥市环保局经济技术开发区分局，安徽 合肥 230601；2．安徽省化工研究院，安徽 合肥 230041) 摘要：从受2，4，6一三溴苯酚 (TBP)严重污染的污泥中分离TBP降解菌，并采用 HPLC分析方法进行复筛，得到高效TBP降解菌株 TBPY，通过细菌的形态特征、培养及生理特征、生理生化实验对TBPY菌株进行了初步的菌种鉴定，最终鉴定该菌株为假单胞菌属 PseudomonasOP,ruginoscTBPY。 关键词：2，4，6一三溴苯酚；降解菌；鉴定；HPLC doi：10．3969／j．issn．1008—553X．2012．03．004 中图分类号：0625．33 文献标识码 ：A 文章编号：1008—553x(2012)03—0011-03 2，4，6一三溴苯酚(TBP)是一种多用途有机溴系 2，4，6一三溴苯酚、乙酸铵 (化学纯，日本)；甲醇、乙 化学物质，常用作反应型阻燃剂和添加型阻燃剂，用于 酸(色谱纯，天津)；超纯水(自制)。 环氧树脂、聚氨酯等高分子材料；在医药工业中用于制 1．2菌种分离纯化、富集及培养基组成 备防腐 、消毒剂。由于多溴二苯醚的安全问题 ，使得以 实验菌种来 自受 2，4，6一三溴苯酚严重污染的污 TBP为原料生产的溴化环氧低聚物优于其它替代品。随 泥。污泥按 1．0％(w，v)的接种量接种牛肉膏蛋白胨培 着合成树脂工业和医药工业的快速发展，其需求量越来 养基中，以逐渐提高双酚A浓度，同时减少其它营养物 越大。目前，环境中已检测出TBP的存在，如包装食物、 质比例的驯化方式，直至得到以双酚A为唯一碳源的 海产食品等，因此，TBP对环境的污染开始引起研究者 高效降解菌。总驯化时间为3个月。反复接种培养 ，分 的注意 】。 离，纯化，直到得到纯的单菌落 。 目前，有关生物降解TBP的研究仅有通过分子生物 驯化基础培养基：K2HPO46g／L；KHzPO40．5g／L；MgSO4 学手段进行改造的降解菌4[1，未见筛选出TBP降解菌的 0．4g~，L；(NH4)2SO40．5g／L；MnSO4·H2O0．056g；FeSO4· 报道。而降解氯酚类化合物的微生物已有较多报道，其中 7H2O0．01g；CaC120．022g；pH 自然，121oC灭菌 30min。 降解 2，4，6一三 氯 苯 酚 的有 黄 孢 原 毛 平革 菌 分离纯化 ／活化培养基 ：牛肉膏0．5g；蛋白胨 1g； Phanerochatechrysosporium，固氮菌Azotobactersp．阁，梭 NaC10．5g；琼脂粉 2～3g；蒸馏水 100mL；pH 自然，121 状牙孢杆Clostridiumsp．，皮氏假单胞菌Ps．pickettiE~等。 灭菌 30rain。 TBP中溴的含量约为72％，碳的含量仅 占21．8％，相对 样品：把TBP配置成20mg／mL的TBP乙醇溶液。 于氯酚类化合物来说 ，TBP中卤素含量远大于氯酚类化 降解培养基：在驯化培养基中加入一定量20mg／mL 合物，其对微生物的毒害作用显然远远大于氯酚类化合 的TBP乙醇溶液 。 物，也正是此原因使得从 自然界筛选到降解TBP的微生 1．3TBP的定量测定 物陷入困境。本研究从受TBP严重污染的污泥中驯化筛 采用高效液