Biochemical and Structural Characterization of Amy1 An Alpha-Amylase from Cryptococcus flavus Expressed in Saccharomyces cerevisiae英文文献资料.docVIP

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2017-05-10 发布于上海
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Biochemical and Structural Characterization of Amy1 An Alpha-Amylase from Cryptococcus flavus Expressed in Saccharomyces cerevisiae英文文献资料.doc

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Biochemical and Structural Characterization of Amy1 An Alpha-Amylase from Cryptococcus flavus Expressed in Saccharomyces cerevisiae英文文献资料

SAGE-HindawiAccesstoResearch EnzymeResearch Volume2011,ArticleID157294,7pages doi:10.4061/2011/157294 ResearchArticle BiochemicalandStructuralCharacterizationofAmy1: AnAlpha-AmylasefromCryptococcusflavusExpressedin Saccharomycescerevisiae AlexsandroSobreiraGaldino, MurieleTabordaLottermann, L′?diaMariaPepedeMoraes, FernandoAraripeGonc?alvesTorres, SoniaMariadeFreitas, andCiranoJos′eUlhoa 1 RobertoNascimentoSilva, 2 AliceCunhaMoralesAlvares,′ 3 3 4 4 3 5 1 2 3 4 5 Laborat′oriodeBiotecnologia,UniversidadeFederaldeS?aoJo?aodel-Rei,35501-296Divin′opolis,MG,Brazil DepartamentodeBioqu′?micaeImunologia,EscoladeMedicina,UniversidadedeS?aoPaulo,14049-900Ribeir?aoPreto,SP,Brazil Laborat′oriodeBiof′?sica,InstitutodeBiologia,UniversidadedeBras′?lia,70910-900Bras′?lia,DF,Brazil Laborat′oriodeBiologiaMolecular,InstitutodeBiologia,UniversidadedeBras′?lia,70910-900Bras′?lia,DF,Brazil Laborat′oriodeEnzimologia,DepartamentodeCi?enciasFisiol′ogicas(ICB),UniversidadeFederaldeGoi′as, 74001-970Goi?ania,GO,Brazil CorrespondenceshouldbeaddressedtoCiranoJos′eUlhoa,ulhoa@icb.ufg.br Received31October2010;Accepted18December2010 AcademicEditor:AlaneBeatrizVermelho Copyright?2011AlexsandroSobreiraGaldinoetal. This is an open access article distributed under the Creative Commons AttributionLicense,whichpermitsunrestricteduse,distribution,andreproductioninanymedium,providedtheoriginalworkis properlycited. Anextracellularalpha-amylase(Amy1)whosegenefromCryptococcus?avuswaspreviouslyexpressedinSaccharomycescerevisiae waspuri?edtohomogeneity(67kDa)byion-exchangeandmolecularexclusionchromatography.Theenzymewasactivatedby + +2 +2 NH4 andinhibitedbyCu andHg .Signi?cantbiochemicalandstructuraldiscrepanciesbetweenwild-typeandrecombinantα- amylasewithrespecttoKmvalues,enzymespeci?city,andsecondarystructurecontentwerefound.Far-UVCDspectraanalysisat pH7.0revealedthehighthermalstabilityofbothproteinsandthedi?erenceinfoldingpatternofAmy1comparedwithwild-type amylasefromC.?avus,whichre?ectedindec