通过暂时免疫抑制研究跨膜蛋白C末端缺失对E_省略_苗株EIAV_FDDV12_体.pdf

第32 卷 第11 期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vol. 32 ，No.11 2010 年 11 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Nov. 2010 doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.11.01 通过暂时免疫抑制研究跨膜蛋白C 末端缺失 对EIAV 疫苗株EIAVFDDV12 体内复制的影响 1,2 2 2 2 2 3 1* 2* 姜成刚 ，马 建 ，林跃智 ，赵立平 ，吕晓玲 ，华育平 ，刘 娣 ，周建华 (1. 黑龙江省农业科学院畜牧研究中心博士后工作站，黑龙江哈尔滨 150086；2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 大动物病研究室，黑龙江哈尔滨 150001；3. 东北林业大学博士后流动站，黑龙江哈尔滨 150086) 摘 要：马传染性贫血病毒(EIAV)减毒疫苗是世界首例慢病毒疫苗，但其作用机理尚不明了。我们的前期研 究发现EIAV 疫苗株EIAVFDDV12 编码跨膜蛋白gp45 的基因在马体内发生高频率G2230A 点突变形成终止子，使该蛋 白C 末端出现 154 个氨基酸的截短。为了探讨该截短蛋白对EIAV 疫苗株生物学特性的作用，本研究以EIAV 弱 毒疫苗株感染性克隆基础上，构建了 gp45 截短型感染性克隆，脂质体转染细胞，增殖传代，获得病毒株 EIAVFDDVTM-36 ，接种到马体内。在接种后 167 d 内未观察到临床症状，连续注射10 d 地塞米松以暂时抑制免疫系 统，并用迟发性超敏反应和淋巴细胞增殖实验评价免疫抑制效果。 结果显示，截短型跨膜蛋白疫苗株 EIAVFDDVTM-36 接种组免疫抑制前后病毒载量和中和抗体效价差异不显著，而完整型跨膜蛋白疫苗株感染性克隆 EIAVFDDVTM-45 接种组4 匹马中3 匹免疫抑制后病毒载量显著上升，同时组内中和抗体效价明显提高。 以上结果表 明，马体特异性免疫压力对EIAVFDDVTM-36 复制无影响，而对亲本株EIAVFDDVTM-45 复制有抑制，显示跨膜蛋白截短型 EIAV 作为疫苗更为安全。但免疫抑制造成的gp45 跨膜蛋白未截短型疫苗株感染性克隆体内病毒载量升高，可以 促使机体产生更高的中和抗体效价，提示该疫苗的安全性和有效性在一定程度内呈负相关(相互制约) 。 因此，安 全性和有效性的平衡是慢病毒减毒疫苗研发需注意的重要因素。 关键词：马传染性贫血病毒；跨膜蛋白；截短突变；体内复制；免疫抑制 中图分类号：S852.65 文献标识码：A 文章编号：1008-0589(2010)11-0829-05 Transient immune suppression of inapparent carrier ponies inoculated with attenuated equine infectious anemia virus infectious clone 1,2 2 2 2 2 3 JIANG Cheng-gang , MA Jian , LIN Yue-zhi , ZHAO Li-ping , LV Xiao-ling , HUA Yu-ping , LIU Di1*, ZHOU Jian-hua2* (1. Postdoctoral Workstation, Livestock Research Center, Heilon