薄层分析酶抑制技术和荧光技术.pptVIP

薄层分析、酶抑制技术和荧光技术 薄层分析、酶抑制技术和荧光技术都是基于薄层展开后用不同的现色方法进行显色分析的技术。其中薄层的制备、展开和显色技术是该分析方法的基础。 薄层技术 薄层色谱法是把固定相（活性吸附剂或键合剂）均匀的铺在一块平整的板上，制成薄板。厚度约0.25mm。与纸上色谱法一样，点样经展开剂展开。 特点：操作简单、效果比纸上色谱法要好。 显色后斑点集中并且可以定量分析（与薄层扫描仪配套）。 试样量少，几微克到几百微克。 可以为高效液相色谱选择合适的固定相。 近代薄层色谱发展的类别简介 薄层板法（略） 圆筒色谱（管状色谱）法 将固定相涂渍在管的外壁上，可以减少横向扩散，宜于制备色谱用。 如果为小孔径管就为色谱棒。 锥形薄层色谱法 将薄层板制作成 倒圆锥体。展开时可以使溶剂前沿 扩大，展开剂向前沿扩散时形成速度梯度，结果抵消了谱带扩展，使试样再度浓缩。 径向薄层色谱法 两种类型：一种与圆形纸上色谱方法相似，分离效果可以提高1.5倍；另一种是将普通薄层板点样处固定相刮去，使展开剂只能通过点样处狭窄部分向前方弧形展开。 连续展开法 在密闭槽中进行上行展开， 展开剂移动一定距离后即终了。 顶板蒸发展开 用盖带有槽孔的展开槽，使部分薄层板露出槽外。展开时，槽里的展开剂不能蒸发，当上升到槽外时就蒸发。这种展开法能够缩短展开剂移动满的斑点之间的距离，不能够提高分离效能。