脂蛋白及其代.pptVIP

2.化学沉淀法 多用磷钨酸－镁沉淀法 卫生部推荐法 原理：一些阴离子（如磷钨酸）与非离子多聚体或某些二价阳离子合用可使除HDL外的含ApoB的脂蛋白都沉淀，然后在行血脂的测定 优点：经济、适用于普通实验室 缺点：易受高TG的干扰，使沉淀后的上清液呈混浊状，且镁离子可抑制酶法测TC的酶活性。 * 3直接测定法 （1）PEG修饰法 PEG修饰酶对不同的脂蛋白中的胆固醇有选择性，其催化次序LDL＜VLDL≈CM＜HDL （2）选择抑制法应用两种不同的表面活性剂及多聚阴离子根据酶反应的选择性直接测定HDL （3）免疫分离法 用PEG和抗B，CⅢ抗体包裹非HDL的脂蛋白然后分析HDL的方法 * （四）LDL测定方法 （1）friedewald计算法 1972年friedewald发明的经验公式 LDL＝TC－［HDL ＋ TG／5］ 条件： ①空腹上清液中不含CM－不是乳糜血 ②TG浓度低于4.6mmol/L ③Ⅲ型高脂血症（IDL增加）除外。 * （2）免疫分离法 1993年leary报道：用PEG使抗E、AⅠ多克隆抗体的胶化株结合血清中，使HDL（AⅠ/E）IDL（E）VLDL（E）和CM（AⅠ／E）与分离试剂中的抗体反应结合然后分离沉淀。取上清液酶法测定LDL含量 代表试剂：美国sigma公司试剂 * （3）均项测定法 （1）表面活性剂法使表面活性剂与血清中的HDL，CM，VLDL分离，然后酶法测定LDL （2）PEG修饰法用PEG修饰酶封闭LDL颗粒，让HDL，VLDL，CM解离，然后酶法测定LDL * （五）载脂蛋白的测定 ApoAⅠ和B的测定 （1）免疫透射比浊法－可用自动化生化仪 （2）免疫散射比浊法－专用比浊仪 * （六）LP（a）的测定 1.人群中的LP（a）呈偏态分布，个体差异较大，其健康人群血浆含量可达0～1000mg/L, 参考值：＜30mg/L 《临床血脂测定建议》指出免疫比浊法为临床实验室LP（a）的常规测定方法，所用的抗体为多克隆抗体或混合微株识别LP（a）上不同抗原位点的单克隆抗体，首选透射比浊法，其次为散射比浊法 * Ⅳ型高脂蛋白血症 表现：高TG，LDL正常，HDL降低，又称高TG血症 原因：病因尚不完全清楚，为显性遗传疾病，VLDL合成亢进，VLDL代谢速度减慢 * Ⅴ型高脂蛋白血症 表现：TG增高，CM和VLDL增高，电泳表现为高CM和高前β－脂蛋白血症共存的混合性高脂血症，4℃放置血清可呈“奶油样”。 原因：LPL活性低下，和ApoCⅡ减少所致，导致TG不能降解和VLDL生成过多，引起血中淤积。 * 第七节脂蛋白代谢与AS的关系 一、血脂与AS的关系 （1）血脂的异常增高是产生AS的重要因素 （2）血管内皮炎症、氧化型LDL在血管内膜中淤积和产生泡沫细胞是形成As的主要原因 （3）高脂血症引起的血粘度的改变，进而改变凝血系统和纤溶系统的各种因子的表达和功能，可促进血栓的形成，加速As的形成和发展 * 高脂血症对纤溶的影响 （1）血脂对血小板功能的影响（血小板聚集作用加强） （2）血脂对纤溶的影响（VLDL是纤溶酶原的激活启动因子） （ 3）血脂对纤维蛋白原的影响（血浆纤维蛋白原的含量与LDL、Lp（a）、和TG正相关，与HDL负相关） * 二、动脉粥样硬化（AS）概述 AS是动脉内膜的脂质、血液成分的淤积和纤维蛋白的增生并伴有钙化和坏死及炎症病变的一类慢性进行性病理过程。目前是人类第一发病率高的疾病，但对其发病机理尚不完全清楚，共同的观点认为：血脂的改变、纤溶系统亢进、高血压和血管内膜炎症是AS的重要病因 * AS的发病机理假说 * 目前对AS研究的新观点 （1）脂蛋白的氧化 oxLDL的形成是炎症分子强有力的诱导物 （2）血栓素和前列腺素平衡失常 血小板的聚集可释放血栓素导致血栓发生 （3）内皮细胞损伤和钙化 内皮细胞损伤激活纤维蛋白激活剂如组织因子，血小板激活因子，IL－1等促血凝物质，导致血管钙化，加剧血栓形成。 * AS的病理特征 （1）局灶性病变易发生于动脉分叉处 （2）病变始发于内皮细胞功能性改变 （3）病变的主要细胞为平滑肌细胞 （4）病灶随严重程度不同在细胞内外有不同的脂质，其中多为TC * 三、脂质异常与AS的发生心血管疾病血脂危险水平的分类(mmol/L) 我国建议血脂异常 欧洲标准 美国标准 TC合适水平 ≤5.2 － ＜5.2