第三章食品微生物检验的试剂及配制.ppt

;;第一节 染料及染液配制技术;二、染料的种类 ;染色细菌标本检查法 －－染料; 碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋电质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等)使其着色。 酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH值下降时，细菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色。 中性染料是前两者的结合物又称复合染料．如伊红美蓝、伊红天青等。 ;;三、常用染液的配制;第二节 常用试剂的配制技术;二、物质的量浓度溶液的配制技术;三、pH指示剂的配制技术;四、血清学反应试剂制备技术;五、生化试剂制备技术及试验法;细菌的生化反应检查法;生化试验的注意事项;;（一）糖（醇）类代谢试验  ; 1. 糖醇类发酵试验;糖发酵试验原理 ;常用的糖醇;2）试验方法;2）试验操作方法;1.糖发酵试验要注意杜氏小管的置入方法； 2.在接种后，轻缓摇动试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡。 ;杜氏小管灌装 ;气泡; 2.V-P试验（乙酰甲基甲醇 试验）;V.P. 试验(伏―普试验);某些细菌在糖代谢过程中，经糖酵解途径产生丙酮酸。 因不同细菌所含酶不同，进一步对丙酮酸的代谢也不同。;;2）V.P.试验;注意事项;中文名称： 大肠埃希菌 ; 3.甲基红（MR）试验 ;检测不同细菌分解葡萄糖产酸的能力。;2）试验方法：;3）结果观察与记录;MR-VP试验原理及照片;1.靛基质（吲哚）试验 2.H2S试验 3.尿素酶试验 ;1.吲哚试验 （靛基质试验）;吲哚试验; 不同微生物所含酶系统不同，某些细菌含有色氨酸酶，能够分解培养基内蛋白胨中的色氨酸。;2）试验方法：;靛基质试验原理及照片 ;2.硫化氢产生试验; ;3）结果观察与记录;3. 尿素分解试验 尿素酶（Urease）试验;2）试验方法：;尿素酶试验图 ;（三） 呼吸酶类试验;1. 氧化酶试验;;;;试剂;;2. 过氧化氢酶试验;2）试验方法;2）试验方法;3）结果观察与记录;3.硝酸盐还原试验;试剂;2）试验方法;3）结果观察与记录;4. 氰化钾试验;2）试验方法;3）结果观察与记录; （四）毒性酶类试验;1. 溶血试验;2）试验方法;平板法;溶血试验的溶血类型及现象;甲型（α-）溶血;β （乙型）溶血;试管法;3）结果观察与记录;2. 血浆凝固酶试验;2）试验方法;有凝块;（2）试管法;阳性反应;金黄色葡萄球菌血浆凝固酶实验 ;3）试管法的结果观察与记录;其他 ; 枸橼酸盐利用试验;肠杆菌科各种细菌利用柠檬酸盐的能力不同，有的菌可利用柠檬酸钠作为碳源，有的则不能。;2）试验方法;3）结果观察与记录;柠檬酸盐试验原理及斜面照片 ; 2.三糖铁（TSI）试验;1）三糖铁试验的原理;制好的培养基;2）试验方法; 已知大肠杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌原理？ ;下面照片所示2-3-4，可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌？ ;思考题;第三节 培养基;微生物的六大营养素;一、培养基的成分与分类;;2.培养基的分类 ⑴按成分的不同分 天然培养基、合成培养基、半合成培养基 ⑵按培养基的物理状态分 固体培养基、液体培养基、半固体培养基 ⑶按培养基用途 基础培养基、选择培养基 增殖培养基、鉴别培养基;二、培养基pH的测定与调整;二、培养基pH的测定与调整;三、常用培养基的制备技术;;2.培养基制备的基本方法和注意事项;;2.培养基制备的基本方法和注意事项;;;（4）培养基各成分的混合和熔化;;; ;3.食品检验常用培养基的制备技术;（1）基础培养基;  ; ; ; ;培养基制备技术 ----培养基分类;培养基制备技术 －－培养基的分类;培养基制备技术 －－培养基制备的基本方法和注意事项 ;二、微生物的培养基;二、培养基的类型及应用 根据营养成分的来源分类：天然培养基、合成培养基、半合成培养基(在生产实践和实验室中使用最多)。 根据物理状态分类：液体培养基、固体培养基、半固体培养基;根据用途分类： 1、实验室用培养基：基础培养基、加富培养基（增菌培养基）、鉴别培养基(例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基) 、选择培养基