分子生物学实验--实验操作.pptVIP

重组人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的构建 分子生物学实验-实验操作 基因、载体、受体菌株 实验技术要求 应掌握的实验技术 酶切,连接 凝胶回收 制备感受态细胞 质粒提取 PCR 琼脂糖凝胶电泳 考察指标 电泳、蓝白斑数量 电泳 感受态细胞转化率 电泳 电泳 电泳 实验流程: 第一天 8AM-5PM （重组载体构建） 实验流程: 第二天 8AM-5PM （重组载体转化宿主细胞） 实验流程: 第三天 1PM-5PM（阳性转化子鉴别及转化效率检验） 实验流程: 第四天 8AM-5PM（含有目的基因重组载体的鉴定） Hybrid site rhIL-18的PCR （1）反应体系 Template DNA 2.0ul 10×buffer 5.0ul MgCl2（25mmol/L） 6.0ul primer1（25umol/L） 1.0ul primer2（25umol/L） 1.0ul dNTP（2mmol/L） 4.0ul Taq酶（5u/uL） 1.0ul 灭菌超纯水 补齐至50ul 双酶切反应（20μL体系） rhIL-18的PCR产物 目的基因 6.8μL Buffer O