x线照射后耐替莫唑胺u251细胞株中多药耐药基因mdr1及p-gp蛋白的表达.pdfVIP

· 60· 主堡塑丝垦堂苤查至Q!鱼生!旦筮!!鲞箜!翅 ·临床研究· X线照射后耐替莫唑胺U251细胞株中 多药耐药基因MDR 1及P．印蛋白的表达 黄从刚 段发亮 陈谦学 吴京雷 黄乔春 陈晓斌 闵强 罗明李乾锋 宋平 430022武汉市第一医院神经外科(黄从刚、段发亮、吴京雷、黄乔春、陈晓斌、闵强、 罗明、李乾锋、宋--T-)；430060武汉，武汉大学人民医院神经外科(陈谦学) 通信作者：段发亮．Email：duanfaliang@126．com DOI：10．3760／cma．j．issn．1671—8925．2016．01．012 【摘要】 目的 观察耐替莫唑胺人脑胶质瘤U251细胞(u251厂rR)经放射线照射后多药耐药基 方法体外常规培养U251细胞，低浓度替莫唑胺分步 因(MDRl)及P．糖蛋白fP-gp)表达的改变。 诱导法诱导建立耐药细胞U251／TR。细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测替莫唑胺、阿霉素、依托泊 苷、硫酸长春新碱和环磷酰胺对U251、U251／TR细胞的相对抑制率和耐药指数(RD。采用双光子医 用直线加速器产生的不同剂量(2、4、6、8、10、12、15Gy)X线照射U251、U251／TR细胞24h后， RT．PCR检测细胞MDRl的表达，Western 结果CCK-8检测 blotting检测细胞膜P．gP的表达。 结果显示替莫唑胺、阿霉素、环磷酰胺、依托泊苷、硫酸长春新碱对U251细胞的抑制率分别为 种药物的RJ分别为U251细胞的2．63、2．76、2．15、10．58、3．54倍；RT—PCR检测显示：2 Gy、4Gy、6 Gy放射线照射U251厂rR和U251细胞后，2种细胞的MDRJ基因表达均依次下降，且6Gy时降至 最低。但经大剂量如8Gy、10Gy、12Gy、15GyX线照射后，2种细胞的MDRl基因表达开始依次上 升，均高于6Gy照射组。Western Gy放射线照射U251厂rR和U251细胞后， blotting结果显示：6 P．gp的蛋白表达均下降。 结论小剂量的X线(8Gy以下)照射后U251、U251／TR细胞的放射敏 感性均增高，但大剂量的X线(8Gy以上)照射后U251／TR、U251细胞均产生放射抗拒。 【关键词】耐替莫唑胺U251细胞；放射敏感性；多药耐药基因；P一糖蛋白 基金项目：国家自然科学基金 【中图分类号】R730．264【文献标志码】A 【文章编号】 1671—8925(2016)01—0060—05 of and intemozolomideresistantU251cell gene P-glyeoprotein Expressionsmultidrug-resistant radiation linesafter exposureHuangConggang,DuanFaliang,ChenQianxue，Wu五，妣i，Huang Xiaobin，MinQiaug,Luo胧％LiQianfeng,Song觑ng Qiaochun，Chen CG，Duan凡，形u of ofWuhau,Wuhan430022，China(14uang DepartmentNeurosurgery,FirstHospital Medwd XB，Min M，Li ofNeurosurgery,Wuhau )L