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植物(烟草)吡哆胺—吡哆醛转换反应作用酶的分离纯化及表征
目录
摘要I
AbstractII
1 文献综述1
1.1维生素 B6简介1
1.2 植物 VB 的从头合成途径1
6
1.3 植物 VB 的补救途径2
6
1.4PM PL 3
与 相互转换代谢酶
1.5PM-丙酮酸转氨酶概述4
2 引言6
2.1 课题研究的目的和意义6
2.2 研究内容6
3 材料与方法7
3.1 材料、仪器和试剂7
3.1.1 材料7
3.1.2 主要仪器和设备7
3.1.3 主要试剂7
3.2 试验方法7
3.2.1 烟草 GOT的分离纯化及部分酶学性质分析7
3.2.1.1烟草 GOT分离纯化7
3.2.1.2 烟草 GOT活性的测定8
3.2.1.3 蛋白质浓度的测定9
3.2.1.4 烟草 GOT部分酶学性质分析10
3.2.2 烟草 PPAT分离纯化及部分酶学性质分析10
3.2.2.1 烟草 PPAT纯化10
3.2.2.2 烟草 PPAT酶活力测定11
3.2.2.3 烟草 PPAT部分酶学性质分析12
4 结果与分析14
4.1 烟草 GOT分离纯化及酶学性质分析14
4.1.1 酶的分离纯化14
4.1.2GOT的部分酶学性质分析16
4.1.2.1GOT的最适反应温度范围16
4.1.2.2GOT的最适 PH值范围16
4.1.2.3 辅酶 PLP及不同底物对酶活的影响16
III
4.1.2.4GOT最佳氨基供体和动力学常数(K )的测定17
m
4.2 烟草 PPAT分离纯化及酶学性质分析18
4.2.1 酶的分离纯化18
4.2.2PPAT的部分酶学性质分析21
4.2.2.1 酶活力与反应时间和酶液量的关系21
4.2.2.2 酶活力与 PM浓度和丙酮酸浓度的关系21
4.2.2.3PPAT的最适反应温度和最适 PH值22
4.2.2.4PPAT PH 22
的 稳定性
4.2.2.5 不同蛋白酶保护剂对 PPAT活性的影响22
4.2.2.6 动力学常数(K )的测定23
m
5 讨论24
5.1GOT与 PPAT的分离纯化24
5.2GOT和 PPAT的最适温度和最适 PH24
5.3辅酶 PLP及不同底物对 GOT酶活的影响24
5.4不同蛋白酶保护剂对 PPAT活性的影响24
6 结论26
6.1GOT的分离纯化26
6.2GOT最适温度和最适 PH26
6.3 辅酶 PLP及不同底物对 GOT酶活的影响26
6.4PPAT的分离纯化26
6.5PPAT最适温度和最适 PH及 PH稳定性26
6.6 不同蛋白酶保护剂对 PPAT活性的
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