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植物(豆芽)吡哆胺—吡哆醛转换反应作用酶的分离纯化及表征
目录
摘要I
AbstractII
1 文献综述1
1.1维生素 B6简介1
1.2 植物体内 VB 的从头合成途径2
6
1.3 植物体内 VB 的补救途径3
6
1.4PM PL 4
到 转换途径作用酶
1.5PPAT的概述5
2引言6
2.1 研究的目的和意义6
2.2 研究内容6
3 材料与方法7
3.1 实验材料、仪器及试剂7
3.1.1 实验材料7
3.1.2 主要仪器和设备7
3.1.3 主要试剂7
3.2 实验方法7
3.2.1 豆芽 GOT的分离纯化7
3.2.2GOT活性的测定[57]9
3.2.3 纯化后的 GOT和不同底物的反应10
3.2.4 辅基 PLP的释放量对 GOT和不同底物反应的影响10
3.2.5 豆芽 PPAT的分离纯化10
3.2.6 豆芽 PPAT活性的测定11
3.2.7 蛋白浓度的测定12
3.2.8SDS检测酶的纯度13
3.2.9PPAT部分酶学性质的研究13
4 结果与分析15
4.1 豆芽 GOT的分离纯化效果15
4.2GOT的纯度鉴定17
4.3 纯化后的 GOT和不同底物反应的活性测定18
4.4 辅基 PLP的释放量对 GOT和不同底物反应的影响结果18
4.5 豆芽 PPAT的纯化效果18
4.6PPAT纯度鉴定21
III
4.7PPAT部分酶学性质的研究22
4.7.1 酶促反应的最适温度22
4.7.2 酶的温度稳定性22
4.7.3 酶促反应的最适 pH值22
4.7.4 酶的 pH稳定性23
4.7.5 双底物乒乓反应动力学常数的测定和底物特异性23
5 讨论25
5.1GOT的分离纯化25
5.2GOT的底物特异性25
5.3PLP辅基对 GOT在 VB6 代谢过程中影响25
5.5PPAT的最适温度、pH及其稳定性26
5.6PPAT的动力学常数26
5.7PPAT的底物特异性26
6 结论27
6.1GOT的分离纯化27
6.2GOT的底物特异性27
6.3PLP GOT VB6 27
辅基对 在 代谢过程中影响
6.4PPAT的分离纯化27
6.5PPAT的最适温度、pH及其稳定性27
6.6PPAT的动力学常数27
6.7PPAT的底物特异性28
7参考文献29
8致谢34
9作者简介35
10研究生期间发表的论文35
IV
1 文献综述
1.1维生素B (VitaminB ,VB )简介
6 6 6
VB 是一类水溶性维生素,遇光或碱易破坏,不耐高温。2-甲基-3-羟基-5-羟甲基
6
吡啶是它们共同的母体,吡啶环第四碳位被羟甲基、氨甲基、甲酰基取代后分别形成
吡哆醇(P
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