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严重联合免疫缺陷小鼠脐血移植后的免疫功能重建.pdf

山东臣珩2∞9 年第49 卷第4 期 严重联合免疫缺陷小鼠脐血移植后的 免疫功能重建 范伟l ,祖存2 ,玛新审l ,李波3 (1贵州省人民医院,贵州贵阳 55ω01 ;2 四川国防医院;3 四川大学华西医院) [摘要] 将严重联合免疫缺陷(SCID) 小鼠分为A、 B、C 三组,A 组:人脐血干细胞输住;B 姐:人脐血干细胞输 注,6 周脂皮下棋种人肝癌细胞株;C 组:来输能人脐血干细胞,6 周盾皮下接种人肝癌细胞株。 3 周盾检测各组免 搜功能3重建情况。结果 A、日细小鼠外周血于第4 周时开始检测别人源 CD; 细胞,两组比较均觉统计学差异。 A, B 组小鼠血中人源 IgG于第 3 周时出现。 C 组第3 周、第 6 周时均未检测到人源 CD; 细胞、人源 IgG。认为人脐血程 序移植加低剂攘的环磷酸腊方案可成功地在SCID 鼠体内建立类似人类免疫。 [关键诩] 脐血;造血干细胞;移植;SCID 小鼠;免搜豫罐 [申困分类号] R457 [文献标识码] B [文章编号] 1∞2-266X( 筑师9)04咽43-02 组锦只小鼠均用单份第 1 次新鲜冻存的复苏脐血干 脐带血含有丰富的造血干/祖细胞,被认为是极 具潜力的新的选血干细胞来糠[1 , 2] 0 2001 年 12 月 细胞自尾静脉穗序移植。移植前24h 腹腔 1 次性 注射环磷毗股150 mglkg; 每次移植前 1 h 皮下注射 -2∞2 和年 12 月,我们建立了脐血移植的动物模 申藕强的松龙,程序移植结束脂再减量用两次;锦次 型,初步观察人脐血干/祖细胞在严重联合免疫缺陷 移植取 1 ml 膜岛素注财器抽取有核细胞悬液0.2 (SCID) 小鼠体内的生伏特性,免疫功能熏建的时间 7 nù( 有核细胞敷量:lx I0 ) ,经尾静脉注射,注射时 与状态,旨在为下…步实验打下基础。 1 材料与方法 性意推注速度不可过快,以防小鼠心脏功能衰竭炖 1. 1 实验动物及分组雄性3 时 5 周龄 SCID 小鼠 亡;C 组作为移植对照将脐血有核细胞改为无菌生 理盐水,锦次自尾静脉注射0.2 m10 21 只,体质量 16 向 20 g ,购于四川省眩学科学院实 1. 3. 2 外周血人摞 CD; 、 CD; 和 CD; 细胞检测 A、 验动物研究所。将 SCID 小鼠随机分为3 组,每组 7 日组移植后第3 周始,每隔 7 d 断愿或穿剌尾静脉 只。 A 组:人脐血干细胞输注;B 组:人脐血干细胞 输注,6 周后皮下接种人肝痛细胞株jC 组:朱输住 用毛细管取血,C 组第 3 周、第 6 周时各取血 1 次 (间样用于 IgG测定) ,用流式细胞仪( FCM) 检测 人脐血干细胞,6 周后皮下接种人肝癌细胞株。 1. 2 主要试剂及仪器 人脐带.IÓl由四川省脐带.IÓl SCID 小鼠外周.IÓl人惊 CD; 、 CD: 、 CD; 细胞。 造血干细胞库采集的足月健康胎儿新鲜脐血。 6% 1. 3. 3 IgG含量检测 双抗夹心 ELISA 法测

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