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刺五加对辐射损伤后小鼠胸腺影响 更新日期：2010-07-07 点击： 张明溪　戎诚兴 提要　用组织学和组织化学方法探讨刺五加对60Co～γ射线照射后所致小鼠胸腺损伤的影响。结果：胸腺皮质淋巴细胞对辐射损伤敏感性明显高于髓质。刺五加能加速胸腺淋巴细胞的持续恢复，促进骨髓干细胞增殖并迁往胸腺，保证了胸腺淋巴细胞正常增殖功能。 关键词　刺五加；　60Co～γ射线；　胸腺 　　刺五加与人参同属，其根、茎是主要药用部分［1］。它含多种与人参相似的有效成份，如刺五加甙、刺五加多糖、多种微量元素等。近代研究表明，刺五加的固本强壮功用主要机理可能是其有效成份能促进葡萄糖6—磷酸合成，mRNA修复，刺激细胞再生，诱导干扰素，增强单核吞噬细胞系统的吞噬能力和提高机体免疫能力。本实验用组织学和组织化学方法观察刺五加对60Co～γ射线照射后所致小鼠胸腺的变化，并探讨其机理。 1　材料和方法 1.1　实验动物：成年小鼠110只(雌雄随机)，体重20～25 g。分3组：正常组10只；用药组、生理盐水组(简称盐水组)各50只。 1.2　实验药品：刺五加注射液，黑龙江省完达山制药厂生产，每安瓿20 ml，每ml相当1 g生药；注射用无菌生理盐水。 1.3　方法 1.3.1　照射方法：将小鼠分装于特别有小方格的有机玻璃盒中，使用湖北医科大学附二医院钅　古机进行一次性均匀全身照射。总剂量4Gy，剂量率1.25Gy/min，照射时间3 min，距离60 cm。 1.3.2　用药组：受照后2 h开始注射稀释刺五加注射液(按20 g生药/kg计算)0.35～0.45 ml/(d*只)，连续给药20 d。 1.3.3　盐水组：时间同上，注射生理盐水，与用药组等量。 1.3.4　正常组：不受60Co～γ射线照射，喂养条件同前两组。 　　各组分别在第3、7、17、25 d分4批颈椎脱臼处死。正常组每次处死3只，用药组、盐水组第3、7 d各10只，第17、25 d各12只，取胸腺。 1.4　观察指标 1.4.1　常规HE染色观察：每蜡块隔50张切片取1张，共取5张作HE染色、组织化学染色备用。HE染色后，在100倍光镜下每片随机测量3处胸腺皮质厚度；400倍镜下计淋巴细胞数，分别求出均数。 1.4.2　免疫母细胞观察：甲基绿派若宁法显示RNA。 1.4.3　分别取第17、25 d胸腺组织0.1 g，制成2%的胸腺组织匀浆，用生物化学方法提取DNA，二苯胺法测定DNA中脱氧核糖，确定胸腺组织中DNA含量。 2　结果 2.1　HE标本观察(见表1、表2) 　　正常组小鼠胸腺组织结构与人相似，有不对称的左右两叶。被膜深入实质将胸腺分隔成许多胸腺小叶。每小叶皮质位于周边，分隔；髓质位于中间连成一片。皮质主要由大量密集淋巴细胞和上皮性网状细胞组成，髓质则由大量上皮性网状细胞和少量淋巴细胞组成。皮质(染色深)与髓质(着色浅)界线明显。 　　受照后第3 d，两组小鼠胸腺皮质淋巴细胞大量减少，以致皮质、髓质界线不清。髓质淋巴细胞未见减少。两组差异无显著性( P＞0.05)。受照后第7 d，用药组胸腺皮质较第3 d有少量淋巴细胞增生，与盐水组相比差异无显著性( P＞0.05)。 　　受照后第17 d，用药组胸腺皮质增厚，淋巴细胞增加，可区分皮质与髓质的结构，小叶清楚。盐水组皮质淋巴细胞变性、坏死、核染色质固缩，皮质与髓质无界线之分。两组相比具高度显著性( P＜0.01)。 　　受照后第25 d，用药组胸腺组织绝大多数恢复正常，皮质淋巴细胞显著增加，厚度正常。盐水组坏死细胞消失，皮质淋巴细胞增多，可区别皮质与髓质，但皮质极薄。两组相比具高度显著性( P＜0.01)。 表1　刺五加对60Co～γ射线照射后小鼠胸腺组织结构的影响 组　别 照射后时 间(d) 动物 (只) 胸腺组织结构损伤程度 P   ± 用药组 3 10 8 2 0 ＞0.05 　 7 10 2 4 4 ＞0.05 　 17 12 1 3 8 ＜0.01 　 25 12 0 2 10 ＜0.01 盐水组 3 10 9 1 0 　 7 10 3 3 4 　 17 12 5 5 2 　 25 12 3 6 3 　 　　注： P值(包括以下各表)为同时间两组的比较 　　　　　强阳性，组织结构重度损伤 　　　　　中等阳性，组织结构中度损伤 　　　　±　弱阳性，组织结构轻度损伤或正常 表2　刺五加对60Co～γ射线照射后小鼠胸腺淋巴细胞数和皮质厚度的影响 组　别 照射后时间(d) 动物(只) 胸腺淋巴细胞数 胸腺皮质 厚度(μm) P 用药组 7 10 152.3±36.1 213.5±31.1 0.05 　 17 10 348.7±21