人mRNA输出因子Gle1及肽链释放因子相互作用的分析.docx

目录 中文摘要………………………………………………………………………………．Ｉ Ａｂｓｔｒａｃｔ…。……………………………．………………………………………．………………．…．……………．．ＩＩＩ 第一章文献综述………………………………………………………………………．．１  １．１  ｍＲＮＡ输出因子Ｇｌｅｌ概述……………………………………………………．．１  １．１．１ １．１．２ １．１．３  Ｇｌｅｌ的结构………………………………………………………………．．１ Ｇｌｅｌ的功能………………………………………………………………．１ Ｇｌｅｌ蛋白与疾病…………………………………………………………．．５  １．２肽链释放因子与蛋白质翻译终止………………………………………………５ １．３研究背景及本课题的意义………………………………………………………６ 第二章人ｍＲＮＡ输出因子Ｇｌｅｌ与第一类肽链释因子的相互作用研究……………．７ ２．１材料…………………………………………………………………………………………………………７ ２．１．１菌株与质粒………………………………………………………………．．７ ２．１．２寡聚核苷酸………………………………………………………………一７ ２．１．３工具酶及试剂……………………………………………………………．．８ ２．１．４主要试剂的配制…………………………………………………………．８ ２．１．５主要实验仪器……………………………………………………………．９ ２．２方法………………………………………………………………………………………………………．１０ ２．２．１酵母双杂交体系研究ｈＧｌｅｌ与第一类肽链释放因子ｈｅＲＦｌ的相互作用 ………………………………………………………………………………………………………………．１（） ２．２．２免疫共沉淀研究ｈＧｌｅｌ与第一类肽链释放因子ｈｅＲＦｌ的相互作用…１１ ２．２．３免疫荧光染色………………………………一…………………………１３ ２．３结果………………………………………………………………………………………………………１ ３ ２．３．１酵母双杂交体系研究ｈＧｌｅｌ与第一类肽链释放因子ｈｅＲＦｌ的相互作用 ………………………………………………………………………………………………………………．１ ３ ２．３．２免疫共沉淀研究ｈＧｌｅｌ与第一类肽链释放因子ｈｅＲＦｌ的相互作用…１６  ２．３．３  ｈＧｌｅｌ与ｈｅＩ强１在ＨｅＬａ细胞中的共定位……………………………．．１８  ２．４讨论………………………………………………………………………………………………………１ ８ 第三章人ｍＲＮＡ输出因子Ｇｌｅｌ与第二类肽链释因子的相互作用研究……………２０  ３．１材料……………………………………………………………………………………………一２０ ３．１．１菌株与质粒………………………………………………………………２０ ３．１．２寡聚核苷酸………………………………………………………………２０ ３．１．３工具酶及生化试剂的配制………………………………………………２０ ３．２方法………………………………………………………………………………………………………２０ ３．２．１酵母双杂交体系研究ｈＧｌｅｌ与第二类肽链释放因子ｈｅＲＦ３的相互作用 ………………………………………………………………………………………………………………．２０ ３．２．２免疫共沉淀研究ｈＧｌｅｌ与第二类肽链释放因子ｈｅＲＦ３的相互作用…２１  ３．２．３  ｈＧｌｅｌ与ｈｅＲＦ３在ＨｅＬａ细胞中的共定位……………………………．．２１  ３．３结果……………………………………………………………………………一２１ ３．３．１酵母双杂交体系研究ｈＧｌｅｌ与第二类肽链释放因子ｈｅＲＦ３的相互作用 ………………………………………………………………………………………………………………．２１ ３．３．２免疫共沉淀研究ｈＧｌｅｌ与第二类肽链释放因子ｈｅＲＦ３的相互作用…２３  ３．３．３  ｈＧｌｅｌ与ｈｅＲＦ３在ＨｅＬａ细胞中的共定位……………………………．．２４  ３．４讨论………………………………………………………………………………………………………．２５ 第四章ｈＧｌｅｌ的过表达对ＨｅＬａ细胞蛋白质翻译终止、蛋白质合成及细胞增殖的影 Ⅱｆ龟………………………………………………………………………………………………………………………．２６ ４．１材料…………………………………………………………………………………………２６ ４．１．１菌株与质粒……………………………………………………………