毛白杨PtAUX1基因表达及其在毛白杨中转化的分析.docx

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2017-05-26 发布于江苏
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毛白杨PtAUX1基因表达及其在毛白杨中转化的分析.docx

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目录中文摘要………：……………………………………………………．……………………………………。ＩＡＢＳＴＲＡＣＴ………………．……………………………………………………………．……………．…………．……ＩＩＩ１弓Ｉ言．．．．…．．．……………．．…………．．……………………………………………………………………．．………．…．．１１．１杨树基因工程……………………………………………………………………………一１１．１．１杨树材性改良基因工程………………………………………………………………。１１．１．２杨树抗虫基因工程………………………………………………………………………．４１：１．３杨树抗旱、耐盐、耐洪涝基因工程…………………………………………………．．６１．２生长素的研究进展………………………………………………………………………．９１．２．１生长素合成及代谢……………………………………………………………………。９１．２．２生长素受体……………………………………………………………………………．．１１１．２．３生长素极性运输………………………………………………………………………１２１．２．４生长素信号转导…………………………………………………………．．．…………．１３１．３本研究的目的和意义……………………………………………………………………．１４２．材料与方法………………………………………………………………………………………………１４２．１实验材料…………………………………………………………………………………１４２．１．１植物材料………………………………………………………………………………１４２．１．２菌株和质粒……………………………………………………………………………．．１５２．１．３酶和生化试剂…………………………………………………………………………１５２．１．４ＰＣＲ引物………………………………………………………………………………………………………１５２．２实验方法…………………………………………………………………………………１５２．２．１目的基因的获得………………………………………………………………………．．１５２．２．１．１总ＲＮＡ的提取…………………………………………………………………．…．１５２．２．１．２反转录ｃＤＮＡ第一链的合成………………………………………………………１６２．２．１．３大肠杆菌感受态细胞的转化……………．…………………………………………１６２．２．１．４碱法大量提质粒……………………………………………………………………．１７２．２．１．５序列测定和比较分析………………………………………………………………．．１７２．２．２表达载体的构建和农杆菌的转化……………………………………………………１７２．２．２．１表达载体构建………………………………………………………………………．１７２．２．２．２根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４感受态的制备………………………………………………１８２。２。２。３冻融法转化农杆菌…………………………………………………………………．１９２．２．３农杆菌介导的毛白杨遗传转化………………………………………………………１９２．２．３．１农杆菌培养…………………………………………………………………………．１９２．２．３．２叶圆盘法转化毛白杨………………………………………………………………．１９２．２．３．３毛白杨组织培养及遗传转化所用的培养基………………………………………．２０２．２．３．４转基因无菌苗的驯化和移栽………………………………………………………．２０２．２．４ＰｔＡＵＸｌ基因的表达分析及转基因植株的检测………………………………………２０２．２．４．１半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测ＰｔＡＵＸｌ基因的表达分析…………………………………．．２０２．２．４．２Ｐ“啪转基因植株的ＲＴ－ＰＣＲ检测………………………………………………２１２．２．５２．２．６Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交…………………………………………………………………………．．２１ＰｔＡＵＸｌ转基因系对植物激素的反应…………………………………………………２１２．２．６．１生长素的反应…………………………………………………………………………２１２．２．６．２细胞分裂素的反应…………………………………………………………………．２１２．２．７ＰｔＡＵＸｌ转基因植株对光照的反应……………………………………………………２１２．２．７．１对光照长度的反应…………………………………………………………………。２１２．２．７．２对光照强度的反应…………………………………………………………………．２２２．２．７．３转基因植株不同时期下的ＲＴ－ＰＣＲ检测……………：…