稀土元素镧与丹参毛状根中活性成分及其生物合成中关键酶的量效关系.pdf

2017年3月 第 19卷 第3期 中国现代中药 ModChinMed Mar．2017 Vo1．19 No．3 · 中药农业 · 稀土元素镧与丹参毛状根中活性成分及 其生物合成中关键酶的量效关系△ 边丽华 ，邹琳 ，周冰谦 ，刘伟 ，周洁 ，¨，王晓 (1．山东省中药质量控制技术重点实验室，山东省分析测试中心，山东 济南 250014； 2．山东中医药大学，山东 济南 250355；3．济南大学 生物科学与技术学院，山东 济南 250012) [摘要] 目的：研究稀土元素镧与丹参毛状根中活性物质及其生物合成中关键酶基 因表达的量效关系，结合 Hormesis效应理论探讨镧调控丹参次生代谢产物的阈值，以期为丹参 中次生代谢产物调控及镧肥的开发提供依据。 方法 ：采用 HPLC法测定丹参毛状根活性成分含量，采用TIANGEN多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取RNA，采 用Takara反转录试剂盒合成cDNA，采用PCR荧光定量试剂盒进行实时定量检测，采用SPSS软件进行数据分析。 结果：镧处理对丹参活性成分积累及关键酶基因表达量影响显著 ，丹参酮 I、丹参酮 ⅡA、迷迭香酸和丹酚酸B表 现出低浓度促进高浓度抑制的 “抛物线”趋势；AACT、C4H、4CL、rAT和HPPR五个关键酶基因表达量同样表现 出低促高抑的 “抛物线”趋势，该趋势符合Hormesis理论曲线。结论：根据Hormesis理论分析，镧对丹参的促进浓 度阈值上限在 0．1～1．0mmoi·L 之间。 [关键词] 丹参；镧；量效关系；Hormesis效应 Dose-effectRelationshipBetweenLaandActiveConstituentandKeyEnzymesExpressionofSalvia miltiorrhiza HairyRoot BianLihua ，ZouLin ，ZhouBingqian ，LiuWei，ZhouJie ，WangXiao (1．KeyLaboratoryofTCMQualityControlTechnology，ShandongAnalysisandTestCenter，Jiuan250014，China； 2．ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine，Jinan250355，China；3．UniversityofJinan，Jinan250000，China) [Abstract] Objective：TheeffectofLaontheaccumulationofactiveconstituentandkeyenzymesexpressionofSalvia miltio~hahairyrootwerestudied andfurthermoresignalingmoleculesmediatingthesynthesisofsecondarymetabolism was alsodefinitedinordertoprovidereferencesfortherevealofsynthesismechanism ofactiveconstituentofSalviamiltio~ha hairy rootinducingbyLa．M ethods：ThecontentofactiveconstituentsweredetectedbyHPLC．RNA wasextractedwithRNA prepPureRNApurificationkit(TIANGEN)．Results：Thedose-effectrelationshipbetweenLaandactiveconstituentandkey enzymesexpressionofSalviam r Ⅱhairyrootshowedaparabolictrend．ThetrendwasinlinewithHormesiseffectcurve． Conclusion：AccordingtotheHormesistheory，theconcentrationupperthresholdofL