水飞蓟宾对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖及mTOR和HIF-1α表达的影响.pdf

引 言 瘢痕疙瘩（Keloid ，K ）是一种继发于皮肤损伤之后，成纤维细胞过度增生， 超出损伤边界具有肿瘤样生长特性的病变，是病理性瘢痕的一种。与正常瘢痕组 织比较，瘢痕疙瘩具有生长过程中侵犯临近组织，自始至终不会退化，手术后极 易复发等特点，由于病因不明，且缺乏有效防治手段，它所引起的瘢痕挛缩畸形 常导致严重功能障碍，造成患者巨大的精神损害和经济负担。对该病的有效预防 和治疗一直是整形外科界迫于解决的热点和难点，也一直困扰着众多临床医师和 研究学者的棘手问题。瘢痕疙瘩几乎是人类特发的一种疾病，在其他物种未见有 自然形成的瘢痕疙瘩。其组织学特点是大量成纤维细胞的增生，细胞外基质中胶 原、蛋白多糖、糖蛋白等过度沉积、胶原纤维排列紊乱。该病发病机制与多种细 胞因子、多种信号转导通路、多种基因有关，它们调节成纤维细胞转化、增殖、 代谢、凋亡。成纤维细胞是瘢痕形成的效应细胞。深入研究信号转导通路与病理 性瘢痕成纤维细胞，可为临床了解病理性瘢痕发病机制和生物学治疗提供依据。 随着近年来大量实验研究的开展，对瘢痕的发生、发展、病因及机制有了较 为深入和全面的认识。哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin ，mTOR) 和缺氧诱导因子1α （HIF-1α）是新近研究备受关注的两种因 子，其在病理性瘢痕成纤维细胞增殖、生长中起重要调控作用，和病理性瘢痕的 发展有密切的关系。 mTOR 可通过mTOR ／p70S6K （核糖体40S 小亚基S6 蛋白激酶）信号途径 影响磷脂酰肌醇-3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（PI3K-Akt ）通路来调节瘢痕的 增殖。mTOR 属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，在体内可磷酸化多种底物蛋白， p70S6K 和4E 结合蛋白(4E-binding protein，4E-BPs)是mTOR 的直接底物，p70S6K 和4E-BPs 活化后能够进一步分别激活核糖体40S 小亚基S6 蛋白和真核起始因 子 4E (eukaryotic initiation factor 4E ， eIF4E) ，从而调控细胞生长、增殖和细胞 周期[1] 。在体外培养瘢痕疙瘩的成纤维细胞中，雷帕霉素可通过抑制细胞中 mTOR 表达而抑制成纤维细胞的生长，当雷帕霉素作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞 时，增殖细胞核抗原(PCNA)、cyclin D1、 纤维粘连蛋白(fibronectin, FN) 胶原 纤维和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达都将下降，与正常成纤维细胞相比，瘢痕 [2] 疙瘩的成纤维细胞中mTOR 的表达增高 。将mTOR 基因转染至NIH3T3 成纤 5 [3] 维细胞，将使得mTOR 的表达增高，并促进成纤维细胞的增殖 。本课题组以往 的研究也证实，4E-BP1 磷酸化底物 eIf4E 在病理性瘢痕中存在高表达，可能对 [4] 病理性瘢痕的形成起重要作用 。因此，mTOR 参与病理性瘢痕的形成发展过程， 如果能有效抑制病理性瘢痕成纤维细胞的中 mTOR 的高表达就可能抑制病理性 瘢痕的生长。 缺氧诱导因子 1α （HIF-1α）也是近年来的研究热点。HIF-1α 是缺氧的特异 感受因子，其基本作用是对缺氧产生适应性反应，HIF-1α 产生后将诱导其他细 胞因子的产生，从而促进病理性瘢痕的形成。有研究报道，在病理性瘢痕组织中， [5] 存在HIF-1α 的高表达 ，因此如果能减少HIF-1α 的产生或者抑制HIF-1α 的活 性，就可能抑制病理性瘢痕的生长。 水飞蓟素（Silymarin）是从菊科植物水飞蓟的种子中提取的黄酮木脂素类成 分，其主要有效成分为水飞蓟宾（Silibinin ）。水飞蓟素具有多种药理活性，在