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第三章 消毒与灭菌 灭菌（sterilization） 指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。 消毒（disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。 防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。 无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。 第一节 物理因素对微生物的影响 热力灭菌法：干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。 二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。 原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （2）湿热的穿透力比干热大； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。 (1)火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，如接种环 。 (2)热空气灭菌法 : 干热灭菌器适用于高温下 不损坏、不变质的物品,如 玻璃器皿、瓷器等的灭菌。 灭菌温度需160℃维持2 h 。 (1)煮沸灭菌 : 煮沸10～20 min可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸1～2 h才被杀死 。用于饮水、一般器械 如刀剪的消毒。 (2)巴氏消毒法 :以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 . 1.低温维持巴氏消毒法 63～65℃30min 2.高温瞬时巴氏消毒法 71～72℃15s 3.超高温巴氏消毒法 132℃1～2s （3）流通蒸汽灭菌法 ：是一种常压蒸汽消毒法，细菌繁殖体15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。 (4) 间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽） 100℃维持30min 温箱过夜 100℃维持30min 温箱过夜 100℃维持30min 温箱过夜 100℃维持30min。 此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌 。 辐射：能量通过空间传递的一种物理现象。 按辐射对微生物的灭活作用分： 1.非电离辐射: 可见光、日光、紫外线 2.电离辐射 : ?、?、γ、χ射线以及高能质子、 中子等 (一)非电离辐射 1.可见光 指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，其波长400～800nm。可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。 光感作用 :指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用 。 2.阳光 直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异 。 (1) ?射线:电离辐射强 ， 穿透力差（ 缺乏穿透力，不实用） (2) ?射线:电离辐射强 ， 穿透力强 (3) ?射线:电离辐射弱， 穿透力强 （4）X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强 用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 杀菌机制：射线使水电离为H＋和OH－，这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身 。 微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要用于菌种和食品的保藏。 五.微 波 从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。所需时间短、加热均匀。主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。 第二节 化学因素对微生物的影响 1.消毒剂 用于杀灭病原微生物的化学药物。 2.防腐剂 用于抑制微生物生长繁殖的化学药物。 消毒剂在低浓度时只能抑菌,而防腐剂在高浓度时也能 杀菌，统称为防腐消毒剂，如酚类、重金属盐类、氧化剂等。 3.化学治疗剂 用于消除宿主体内病原微生物或其它寄生虫的化学药物，如磺胺类药物。 第三节 生物因素对微生物的影响 一.抗生素、植物杀菌素和细菌素