细菌性疾病监测标本采集常见问题及技术要求-培训课件.ppt

* 免疫规划针对细菌性传染病样本的采集、保存及运输 李漫时 2015-06-05 * 山东省 2012-2015 年流脑健康 人群带菌率调查结果 市 地 2012/2013 2013 2013/2014 2015 样本数 / 初筛株 阳性率 (%) 样本数 / 初筛株　 阳性率 (%) 样本数 / 初筛数　 阳性率(%) 样本数 / 初筛株　 阳性率 (%) 济南 420/8 1.9 210/1 0.48 420/17 0.95 210/5 0.9 潍坊 420/20 1.19 210/7 1.9 420/50 0.71 210/12 0 济宁 420/41 1.19 210/6 0.48 420/28 0.24 210/12 0 威海 420/19 0.48 210/13 0 420/18 0.48 210/7 0 临沂 420/50 3.81 210/12 2.86 420/53 1.43 210/16 0.9 德州 420/57 5.0 210/9 2.38 420/54 1.43 210/12 0 合 计 2520 2.26 1260 1.35 2520　 0.87 1260 0.317 * 合格样本采集的前期工作 明确采样目的：通过实验室检测手段，对不明原因的病人或者人群进行确诊和溯源。以达到早发现、早诊断、早治疗、早隔离的目的。 采前需知：样本种类？采集时间？信息？采集方法？样本 量？保存？送样？ 做好准备工作：落实参加人员（培训）、样本采集所需器材物品、防护措施、样本的运送方式及工具。 认真落实并实施：职责划分与落实、沟通协调（省市间、市县间、流调人员与检验人员间），结果反馈。 * 样本采集的要求 及时性？病源样本、脑脊液样本、血清样本 合理性？双份血（病例的急性期与恢复期血清；免疫成功率血清） 信息的清晰与完整性？归属关系，采样日期，检测样本编号与样本来源者一致性问题 采样部位的准确性？ 样本量足够？脑脊液、血清 密闭性：防治泄漏 避免污染：废弃物的处理 * 采前准备（一） 人员的培训：人员相对固定（尤其是实验 室人员）； 采样器材的准备； 采样基本信息登记表； 个人防护措施：隔离衣、口罩、手套、鞋套等 样品的运输和保存措施； * 采前准备（二） 鼻咽拭子：平板、无菌咽拭子、压舌板； 血样本：平板（增菌液）、一次性注射器、采血管、止血带、无菌棉签； 脑脊液：平板、无菌保存管； 信息记录：油性笔、签字笔、采样单； 样品保存措施：冰排、冷藏箱、热水袋等（视样本种类选择）； 其他：试管架、剪刀、酒精/碘酒、胶布、酒精灯、防护用品、垃圾袋等。 * 样本的采集 样本的采集 样本的处理 常见问题及要求 * 流 脑 CSF样本 如果为疑似脑膜炎病例,脑脊液是分离和鉴别病原菌的最佳样本。采集过程应无菌操作，至少1～3mL。可用0.1～0.5 mL直接接种巧克力或双抗巧克力平板，其余应立即送至微生物学实验室进行样本处理与保存。 适宜检测的样本为脑脊液（CSF）、血液、皮肤黏膜瘀点或瘀斑组织液及鼻咽拭子。 * 流 脑 血液样本 无菌操作抽取发热患者全血5～10 mL，取0.1～0.5ml直接接种巧克力或双抗巧克力平板，1 mL用来作血清学检测，其余采集后应立即注入30ml增菌用的葡萄糖肉汤增菌液内。患者应采集发病早期和恢复期双份全血各约1mL，检测血清中特异性抗体滴度。 。 瘀点或瘀斑 选取患者皮肤上的新鲜瘀点或瘀斑，生理盐水消毒后用针头挑破，挤出组织液，用消毒的玻片直接蘸取组织液涂片，革兰氏染色镜检。也可用无菌棉签沾取组织液接种含双抗的葡萄糖肉汤管中，送至微生物学实验室进行检测。 * 流 脑 鼻咽拭子样本的采集：对病人密切接触者和健康人群进行带菌检验时采集鼻咽拭子。 采样时令受检者张开口，用无菌棉拭子探入口腔内悬雍垂后面的鼻咽部位，涂抹该 部位粘膜分泌物，直接接种双抗巧克力平板，也可将咽拭子放入液体双抗增菌管内，一 送至微生物学实验室进行检测。 注：鼻咽拭子相比口咽拭子可以产生较高的阳性结果，因此咽拭子采集部位很重要 * 咽拭子采集 * 流 脑 注意事项 脑膜炎奈瑟菌对温度较为敏感，温度过高或过低均可导致菌株死亡。采集样本后，应尽量做到旁床接种，若无可能则应在最短时间内送至实验室进行接种培养。 接种过的培养基可在室温（20℃～25℃）放置4～6小时，运送温度不低于18℃不高于37℃。切记不能低温运送。用于进行血清抗体及分子生物学检测的CSF和血液