HPLC法测定血脂灵胶囊中大黄素的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定血脂灵胶囊中大黄素的含量论文 .freel。结果：大黄素（C15H10O5）对照品在0.0565—0.1695μg范围内成良好的线性关系，平均回收率为97.69%，RSD为1.64%。结论：方法简便、灵敏、准确，可作为血脂灵胶囊质量控制方法。 关键词：血脂灵胶囊 大黄素 高效液相色谱法。 1、仪器与试药 1.1、 仪器 高效液相色谱仪（日本岛津公司）：LC-10AT泵，SPD-10A紫外检测器，CTO-10S柱温箱.freel-pack VP-ODS C18柱（150×4.6mm，5μg）；流动相：甲醇：0.1%磷酸溶液（85：15）；流速：0.8ml/min；检测波长：254nm，柱温：30℃；进样量：20μl。 2.2、 系统适用性实验 2.2.1、理论塔板数（N） 取大黄素对照品溶液适量，注入液相色谱仪，测定，结果大黄素对照品N=7228，因此，将理论塔板数暂定为3000。 2.2.2、分离度（R） 取供试品溶液适量，注入液相色谱仪，测定，结果大黄素的分离度R=5.0，符合《中国药典》2005年版一部规定。 2.2.3、拖尾因子（T） 利用分离度测定的图谱，大黄素T=1.03（0.95 T 1.05）。符合《中国药典》2005年版一部规定。 2.3、 线性范围的考察 分别精密吸取大黄素对照品溶液（11.3μg/ml）5.0、7.5、10.0、12.5、15.0μl，依次注入液相色谱仪，按上述色谱条件，分别进行分析，测定其峰面积值，并以对照品量（X）为横坐标，峰面积值（Y）为纵坐标，得大黄素回归方程：Y=2509642X-4639（r=0.9999，n=5）。结果表明：大黄素对照品在0.0565～0.1695μg范围内成良好的线性关系，结果见表1。 表1 大黄素的线性范围 2.4、精密度试验 精密吸取大黄素对照品溶液20μl，连续进样5次测定峰面积值，计算RSD=0.56%，结果见表2。 表2大黄素的精密度试验结果（n=5） 试验证明，本法精密度良好。 2.5、稳定性试验 取供试品溶液，每隔2小时进样，测定峰面积，结果表明：供试品溶液在所测定的10小时内测得结果基本一致，大黄素的RSD=0.60%，见表3。 表3 稳定性试验 表5 2.8、试液的制备 对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含大黄素5μg的溶液，作为对照品溶液。 试验表明：供试品溶液至少在10小时内稳定。 2.6、重复性试验 取批号为050812的血脂灵胶囊，分别制备6份供试品溶液，按上述色谱条件测定大黄素的含量，结果见表4 表4 重复性试验 实验表明：本法重现性良好。 2.7、回收率试验 取已知大黄素含量（0.24mg/粒）的样品（批号：050812）6份，每份约0.25g，分别精密加入大黄素对照品溶液（0.1445mg/ml）1ml，按上述供试品溶液的制备方法进行制备，测定，结果见表5。 2.8、试液的制备 对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含大黄素5μg的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备 取本品内容物，研细，取约0.45g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置具塞烧瓶中，蒸干，加2.5mol/L硫酸溶液10ml和三氯甲烷20ml，加热回流2小时，分别取三氯甲烷液，水层用三氯甲烷振摇提取，合并三氯甲烷液，用水10ml洗涤取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取续液，作为供试品溶液。 阴性对照品溶液的制备 按处方组成，提取制何首乌、决明子外的其余药材，按制备工艺要求，制成不含制何首乌、决明子的颗粒，按供试品溶液制备项下的方法，制成阴性对照品溶液。 3、讨论 血脂灵胶囊，为血脂灵片改变剂型而成，其处方与血脂灵片相同，生产工艺为质的改变，一粒胶囊相当于一片片剂（所含生物量为2g）其用法用量与血脂灵片相同，参照2005年版中国药典一部，血脂灵片含量测定项的含量限度的规定及本品的十批样品的含量测定结果。考虑到药材的不同来源及工业化大生产的特点等因素，将本品的含量限度订为本品每粒含制何首乌、决明子以及大黄素（C15H10O5）计不得少于0.15mg。经十批样品检查，含量均符合规定。