T-2毒素胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制.pdfVIP

2013年 9月 食品研究与并发 第34卷第 17期 FoodResearchAndDevelopment 检测分析 -== 96 DOI：10．3969~．issn．1005-6521．2013．17．026 T一2毒素胶体金免疫层析 快速检测试纸条的研制 徐小婧，王俊平。王霄雪，谈超 ，王硕 。张燕 (天津科技大学食品营养与安全教育部重点实验室，天津 300457) 摘 要：应用胶体金免疫层析技术，研制出一种快速检测T一2毒素的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备 20nm胶体 金，标记抗T一2毒素多克隆抗体并喷于玻璃纤维上，T一2毒素偶联抗原和羊抗兔二抗分别结合于硝酸纤维素膜上，经 过试纸条层析条件优化，依次将样本垫、金标结合释放垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条。测试结果 表明T一2毒素快速检测试纸条的灵敏度为50 g几，检测时间为 10min，批 内和批间重复性好 ，保存期为3个月。使用 简单方便，非常适合现场快速检测T一2毒素。 关键词：T一2毒素；胶体金免疫层析；快速检测试纸条 DevelopingGoldImmunochromatographyTestStripforRapidDetectionofT-2Toxin XUXiao-jing，WANGJun—ping，WANGXiao—xue，TANChao，WANGShuo，ZHANGYan (KeyLaboratoryofFoodNutritionandSafety，MinistryofEducation．TianjinUniversityofScience Technology，Tianjin300457，China) Abstract：ToestablisharapidassayfordetectionofT-2toxin，goldimmunochromatographyassay(GICA) wasused．ThepolyclonalantibodytowardsT一2toxinmarkedby20nm Colloidalgoldwassprayedontotheglass fiber．T-2HS—OVAandgoatanti—rabbitIgGantibodieswere et—positionedontonitrocellulosemembrane．After theconditionsofchromatographicwereoptimized，samplepad，goldconjugatepad，nitrocellulosemembrane andabsorbentpaperwereassembled．respectively．Theresultsshowedthatthevisualdetectionlimitofrthe rapidassayofT一2toxinwas50Ixg／L，detectiontimeiswithin10minutesandrepeatabilityofthestripwasgood． Theshelf-lifeisthreemonth．TheassayissimplyusedfortherapiddetectionofT一2toxinon-site． Keywords：T一2toxin；goldimmunochromatographyassay；rapidteststrip T一2毒素为 白色针状结晶，熔点 150℃～151℃，难 肯定的致畸陛和致突变性 。主要污染小麦、玉米、大 溶于水，易溶于极性溶剂，如三氯 甲烷、丙酮和乙酸乙 麦、燕麦和黑麦等谷物及麦芽、啤酒等食品，在美洲 、欧 酯等。烹调过程不易将其破坏。分子式为 c O。，分子 洲等各洲的谷物 中广泛存在 ，国内报道在大骨节病病 量为466。基本结构为四环的半倍萜 ，C一9和c一10位 区小麦和玉米中均有检出口1。目前国际上对T一2毒素 上有不饱和