异基因造血干细胞移植后受者骨髓的间充质干细胞来源研究论文.docVIP

　　异基因造血干细胞移植后受者骨髓的间充质干细胞来源研究论文 .freelal Stem Cells in Bone Marro Cell Transplantation Abstract The aim of this study arroesenchymal cells in 34 patients ismatched hematopoietic stem cells transplant (HSCT).The mesenchymal stem cells (MSC) from 34 patients etry (FCM) to reveal the cell surface antigen expression.The polymerase chain reaction (PCR) analysis of the amelogenin (AMEL) genes host cells.The cultured MSC osomes X (Xp11.1-Xq11.1) and Y (Yq12) to distinguish donor cells from host cells.The results indicated that 31out of 34 cases shoa and 24 out of these 31 cases ore than 5 generations ber of CD14+CD45+ cells，onocyte/macrophage from the cultured MSC (passage 5) arro the passage 5 onstrated that marro the passage 5 arro cell transplantation ed to be derived still from the recipients their ootopoietic stem cell transplantation; allogeneic hemotopoietic stem cell transplantation; mesenchymal stem cells 源于人骨髓的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC），占骨髓中有核细胞的0.01%-0.001%。从骨髓中分离出的MSC能在体外大量扩增且具有自我更新的能力［1］。MSC能产生多种细胞因子、化学因子及细胞外基质蛋白，在造血细胞的生长、成熟、归巢及增殖中均具有重要的作用［2-5］。在异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)临床植活的患者中MSC是否为供者植活一直存有争议［6-11］，目前对SCT后患者MSC的来源问题尚无定论。本研究选择临床上供受者性别不同的allo-HSCT后临床造血植活的34例患者作为研究对象，对allo-HSCT 后造血植活患者中骨髓源的MSC的植活来源，进行了研究。 材料和方法 病例 病例来自北京大学人民医院或北京道培医院，为供受者性别不同、造血植活的allo-HSCT患者共34例，其中男性17例，女性17例，年龄介于16至48岁之间。预处理包括马利兰（busulfan，Bu）/环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）或Bu/CTX加抗胸腺细胞球蛋白（antithymocyte globulin，ATG）。造血干细胞来源为：骨髓移植者3例，动员的外周血干细胞移植者2例，骨髓加动员的外周血干细胞移植者19例，骨髓加动员的外周血干细胞再加第三者脐血混合移植者10例。移植后给予的免疫抑制剂：氨甲喋呤（methotrexate，MTX），霉酚酸酯（mycofenolate mofitile，MMF）及强的松等。利用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）、人类白细胞抗原(human leucocyte antigen，HLA)分型及短串联重复序列聚合酶链反应（short tandem repeat-polymerase chain reaction，STR-PCR）等方法进行造血植活及嵌合分析（附表）。Table.Characteristics of 34 patients received HSCT（略） MSC的分离及纯化 对患者及供者行髂后上棘穿刺抽取骨髓血10 ml，骨髓用PBS (0.01 mol/L，pH 7.4)1∶1稀释后，Percoll（比重1.073 g/ml）900×g梯度离心30分钟，离心后收获分离的单个核细胞，用DMEM-LG洗2次，以1.4×105 /cm2的细胞密度接