组织中的糖、脂、蛋白质.ppt

* 三、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测的原理 [连一连] 糖类的检测 蛋白质的检测 脂肪的检测 1．实验步骤 50%酒精的作用——洗掉浮色 现配现用 2．实验注意问题 注：非还原糖(如蔗糖)＋斐林试剂 现象: (1)还原糖鉴定实验 浅蓝色 Cu(OH)2的颜色 1.还原性糖与非还原性糖： 还原性糖： 非还原性糖： 有还原性基团——游离醛基或酮基的糖； 如:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖。 淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。 斐林试剂（现配现用） 还原性糖（醛基）＋斐林试剂→ 砖红色沉淀 3.反应原理: 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O 2.鉴定还原糖的试剂： 为什么不用植物的叶或西瓜与西红柿的果实?？ 由于叶片中叶绿素的颜色较深，西瓜与西红柿的果实颜色为红色，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜作实验材料。 2．实验注意问题 (1)还原糖鉴定实验 ①浅色浅：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。 ②还原糖含量高：不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖) 4.材料的要求: （2）鉴定淀粉的方法： 碘—碘化钾溶液（蓝色） （3）脂肪的鉴定 1．方法： 染色时间 脂肪滴颜色 橘黄色 红色 2~3分钟 1分钟 苏丹III 苏丹IV 3．鉴定脂肪的实验材料 最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。 2．实验注意问题 P18 2种方法 2.试剂 3．在下列四支试管中分别加入一些物质。甲试管：豆浆；乙试管：人体必需的8种氨基酸溶液；丙试管：牛奶和蛋白酶；丁试管：人血液中的红细胞和蒸馏水。上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后，有紫色反应的是(　　) A．甲、丁 B．甲、乙、丁 C．甲、乙、丙 D．甲、丙、丁 D （4）蛋白质（三肽、多肽）的鉴定 2．实验注意问题 实验材料： 最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官）， 植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋清 注:蛋清作材料，必须稀释。预留部分组织样液做对比 二苯胺试剂（蓝色） （5）DNA的鉴定 P26 混合染色剂：甲基绿使DNA分子显绿色。 吡啰红使RNA分子显红色。 试剂： 4．用碘液、苏丹Ⅲ染液和双缩脲试剂测得甲、乙、丙三种植物的干种子中三大类有机物的颜色反应如下表，其中“＋”的数量代表颜色反应深浅程度，下列有关说法不正确的是(　　) 种子试剂 碘液 苏丹Ⅲ染液 双缩脲试剂 甲 ＋＋＋＋ ＋＋ ＋ 乙 ＋＋ ＋＋＋＋ ＋＋ 丙 ＋ ＋＋ ＋＋＋＋ A.乙种子中主要含蛋白质 B．碘液、苏丹Ⅲ染液和双缩脲试剂与相应的物质发生的颜色反应分别是蓝色、橘黄色和紫色 C．在观察颜色时有可能用到光学显微镜 D．这三种试剂的使用均不需要水浴加热 A 淀粉 注意事项 实验现象 实验试剂 鉴定物质 斐林试剂 砖红色沉淀 试剂现用现配、沸水浴加热 苏丹III、IV III橘黄色IV 红色 可用显微镜观察 双缩脲试剂 紫色 先加NaOH,后加CuSO4 二苯胺 蓝色 沸水浴加热 碘液 蓝色 操作（见下）P102 黑暗处理→对照处理（如遮光）→酒精脱色→清水冲洗→碘液检验 还原糖、脂肪、蛋白质、DNA的鉴定 还原性糖 脂肪 蛋 白 质 DNA 不 同 点 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 使用方法 实质 反应条件 反应原理 颜色 浓度 乙液CuSO4浓度为0.05 g/mL B液CuSO4浓度为0.01 g/mL 相 同 都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是 0.1 g/mL 甲液和乙液混合均匀后即可使用，且现配现用 使用时先加A液再加B液 新配制的Cu(OH)2反应 碱性条件下的Cu2＋ 需水浴加热 不需加热即可反应 还原糖中的 醛基被Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原为Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2＋反应生成络合物 砖红色 紫色